پديد آورنده :
محمدزاده ورپشتي، اصغر
عنوان :
ارزيابي قابليت فرم نو تركيب چهار ايزوفرم مختلف متالوتيونين برنج ﴿ Oryza sativa﴾ به فلزات آرسينك ، جيوه و كروم
مقطع تحصيلي :
كارشناسي ارشد
گرايش تحصيلي :
بيوتكنولوژي
محل تحصيل :
اصفهان: دانشگاه صنعتي اصفهان، دانشكده كشاورزي
صفحه شمار :
سيزده، 92ص.: مصور
استاد راهنما :
آذر شاهپيري
توصيفگر ها :
بيان پروتئين , منحني رشد , كروماتوگرافي تمايلي , فيلتراسيون ژلي , معرف المن
تاريخ نمايه سازي :
1394/10/12
استاد داور :
مجيد طالبي، امير مساح
تاريخ ورود اطلاعات :
1396/10/06
چكيده فارسي :
چكيده متالوتيونينها MTs يك خانواده پروتئيني با وزن مولكولي پايين و غني از سيستئين هستند كه در گياهان جانوران قارچها و سيانوباكتري ها يافت ميشوند اين خانواده پروتئيني نقش مهمي در هوموستازي فلزات از طريق اتصال به فلزات به عهدهدارند اخيرا نقش اين پروتئينها در محافظت سلول در برابر استرسهاي اكسيداتيو نيز گزارششده است در گياهان ايزوفرمهاي مختلفي از MT وجود دارد كه بر اساس آرايش سيستئينها در دو انتهاي آمينو و كربوكسي به چهار تيپ مختلف تقسيم ميشوند تاكنون ژن كد كننده 1 ايزوفرم متالوتيونين برنج به نامهاي OsMTI 3a OsMTI 2b OsMTI 1b و OsMTII 1a كه به ترتيب بر اساس آرايش سيستئين در انتهاي آمينو به 1 تيپ III II I و IV تعلق دارند بهصورت هترولوگ در باكتري E coli و به همراه شريك الحاقي GST توليد شدند بااينوجود قابليت اتصال اين ايزوفرمها تنها با فلزات دو ظرفيتي مورد ارزيابي قرارگرفته است در اين مطالعه بهمنظور ارزيابي قابليت اتصال ايزوفرمهاي مختلف متالوتيونين به فلزات 3 As3 Cr6 Cr بهعنوان فلزات با ظرفيتهاي 9 و 2 و درنهايت 2 Hg كه از درجه اهميت بااليي ازلحاظ سميت برخوردار است اقدام به طراحي آزمايش در دو سطح اينويترو اينويوو كرديم در سطح اينويوو اقدام به ترسيم منحني رشد سويههاي بيانكننده پروتئين هاي نوتركيب و سويه شاهد در حضور فلزات هدف و همچنين ميزان كاهش اين فلزات از محيط كشت سلولي از طريق دستگاه طيفسنج جذب اتمي كرديم نتايج حاكي از آن هست كه بيان پروتئينهاي نوتركيب در سويههاي بيانكننده باعث افزايش مقاومت نسبي و متفاوت آن ها و به طبع كاهش بيشتر فلزات هدف از فاز محيط كشت در مقايسه با سويه شاهد ميشود كه در يك نگاه كلي ميتوان نحوه تأثير سويههاي بيانكننده ايزوفرمهاي مختلف متالوتيونين در اين سطح از آزمايش را در مواجهه با فلز 2 Hg بهصورت R MTI R MTII R MTIII R MTIV در مواجهه با 3 Cr و 6 Cr به ترتيب بهصورت R MTI R MTIII R MTII R MTIV و R MTI R MTIII R MTII R MTIV و درنهايت در حضور 3 As در محيط كشت سلولي بهصورت R MTI R MTII R MTIII R MTIV نشان داد بهمنظور تعيين قابليت اتصال اين ايزوفرمها به فلزات اشارهشده در سطح اينويترو ابتدا مقادير بااليي از فرم نوتركيب پروتئين در محيط كشت حاوي فلز روي توليد و با استفاده از دو مرحله كروماتوگرافي تمايلي و فيلتراسيون ژلي مورد خالصسازي قرار گرفتند به منظور توليد آپوپروتئين و درواقع حذف فلز روي از روش اسيدي كردن پروتئين استفاده شد فلزهاي جداشده با استفاده از فيلتراسيون ژلي حذف شدند سپس پروتئين در معرض مقدار بااليي از فلزات 3 Cr6 Cr3 As و 2 Hg قرار داده شدند و مجددا بهمنظور حذف فلزات اتصال نيافته فيلتراسيون ژلي انجام شد عالوه بر ارزيابي تغيير در الگوي جذب قدرت اتصال اين فلزات با استفاده از يك واكنش رقابتي با معرف المن مورد ارزيابي قرار گرفت نتايج نشان داد كه اوال در محيط اينويترو امكان اتصال فلز به متالوتيونينها وجود دارد بااينحال فلزات باقدرت اتصال متفاوتي به ايزوفرم هاي مختلف اتصال يافتهاند بهطوريكه در اين مرحله از آزمايش اين قدرت اتصال براي پروتئين نوتركيب MTI بهصورت 6 Hg2 As3 Cr3 Cr در مورد MTII بهصورت 6 Hg2 Cr3 As3 Cr در خصوص MTIII بهصورت 3 Hg2 Cr3 Cr6 As و درنهايت در مورد پروتئين نوتركيب MTIV بهصورت 3 Hg2 Cr3 Cr6 As مشخص شد كلمات كليدي متالوتيونين بيان پروتئين منحني رشد كروماتوگرافي تمايلي فيلتراسيون ژلي معرف المن
استاد راهنما :
آذر شاهپيري
استاد داور :
مجيد طالبي، امير مساح
