پديد آورنده :
دهقاني زاده، فرزانه
عنوان :
اثر تيمارهاي كينتين و جيبرلين در بيان برخي از ژن هاي گلدهي در گياه زعفران (.Crocus sativus L)
مقطع تحصيلي :
كارشناسي ارشد
گرايش تحصيلي :
بيوتكنولوژي كشاورزي
محل تحصيل :
اصفهان: دانشگاه صنعتي اصفهان، دانشكده كشاورزي
صفحه شمار :
دوازده، ۷۳ص.: مصور، جدول، نمودار
استاد راهنما :
بدرالدين ابراهيم سيد طباطبايي، مجيد طالبي
توصيفگر ها :
زعفران , گلدهي , هورمون , Real-time PCR , MYB , UGT , AP1
استاد داور :
رحيم مهرابي، امير مساح
تاريخ ورود اطلاعات :
1396/11/17
چكيده فارسي :
چكيده زعفران Crocus sativus متعلق به خانواده Iridaceae و به عنوان گرانترين ادويه در جهان شناخته ميشود زعفران داراي شش مرحله كليدي در چرخه زندگي خود است در بين اين مراحل مرحله گلدهي زعفران از اهميت ويژهاي برخوردار است ژنهاي زيادي فرآيند گلدهي در اين گياه را كنترل ميكنند كه در ميان آنها از ژن 1 AP به عنوان نشانگر فرآيند گلدهي نام برده شده است تركيبات متنوعي در كالله زعفران توليد ميشود كه در اين ميان كارتنوئيدها مهمترين و شاخصترين تركيبات كالله زعفران هستند كه مسئول ايجاد رنگ در اين ادويه ميباشند مرحله نهايي توليد كارتنوئيدها كه شامل گلوكزيله شدن تركيبات حاصل از شكست زئاگزانتين است توسط آنزيم گلوكوزيل ترانسفراز 2 كه توسط ژن 2 UGTCs كد ميشود انجام ميگيرد در باالدست هر دو ژن 1 AP و UGT خانواده عوامل رونويسي MYB قرار دارد بررسيها نشان ميدهد كه بيان اين ژن تحت تاثير هورمونهاي گياهي قرار دارد لذا هدف از اين تحقيق بررسي تاثير هورمونهاي مختلف بر ميزان بيان ژن MYB و همينطور بيان ژنهاي 1 AP و UGT ميباشد بدين منظور ابتدا كورمهاي زعفران به وسيله تيمارهاي هورموني جيبرليك اسيد 100 ppm و 002 ساليسيليك اسيد 50 ppm و 001 كينتين 10 ppm و 02 جيبرليك اسيد 200 ppm كينتين 20 ppm ساليسيليك اسيد 50 ppm كينتين 20 ppm جيبرليك اسيد 200 ppm ساليسيليك اسيد 100 ppm كينتين 20 ppm و همچنين اكسين 100 g Corm جيبرليك اسيد 100 g Corm تيمار شد پس از كشت و قبل از نمونه برداري مجددا تيمارهاي هورموني به صورت آبياري اعمال گرديد ونمونهبرداري از بافت برگ در دو زمان 21 و 42 ساعت پس از هورموندهي انجام شد به منظور انجام Real time PCR آغازگرهاي اختصاصي از روي تواليهاي موجود در بانك اطالعاتي NCBI به وسيله نرم افزار 7 Oligo طراحي شد و تغييرات بيان ژنهاي مذكور تحت تيمارهاي هورموني طي واكنش Real time PCR مورد ارزيابي قرار گرفت در اين تحقيق عليرغم آزمودن جفت آغازگرهاي مختلف براي تكثير و متعاقبا اندازهگيري بيان ژن MYB تكثير مناسبي حاصل نگرديد و اندازهگيري بيان اين ژن ميسر نشد نتايج دادههاي حاصل از Real time PCR دو ژن 1 AP و UGT نشان داد كه كينتين در غلظتهاي 10 ppm و02 در هر دو زمان نمونه برداري ساليسيليك اسيد در غلظت 50 ppm و 001 در هر دو زمان نمونهبرداري جيبرلين در غلظت 200 ppm در 21 ساعت پس از هورموندهي تركيب هورموني جيبرلين 200 ppm ساليسيليك اسيد 100 ppm كينتين 20 ppm در هر دو زمان نمونه برداري و تركيب ساليسيليك اسيد 50 ppm كينتين 10 ppm نيز در هردو زمان نمونهبرداري به طور معناداري بيان ژن 1 AP را افزايش دادند اما هورمون جيبرلين در غلظت 200 ppm در هر دو زمان نمونهبرداري و در غلظت 100 ppm در زمان 21 ساعت و تركيبهاي هورموني اكسين 100 g Corm جيبرلين 100 g Corm در هر دو زمان نمونهبرداري و جيبرلين 200 ppm كينتين 20 ppm در هر دو زمان نمونهبرداري به طور معناداري كاهش بيان ژن 1 AP را به همراه داشتند در مورد ژن UGT نيز هورمونهاي كينتين در غلظتهاي 10 ppm و 02 در هردو زمان نمونهبرداري ساليسيليك اسيد با غلظت 100 ppm در هردو زمان نمونه برداري و با غلظت 50 ppm در زمان 42 ساعت پس از هورموندهي تركيبهاي هورموني جيبرلين 200 ppm ساليسيليك اسيد 100 ppm كينتين 20 ppm و همينطور جيبرلين 200 ppm كينتين 20 ppm منجر به افزايش بيان معنيدار آن شدند وساير تركيبات تغيير معناداري در بيان ژن مذكور ايجاد نكردند با توجه به اين نتايج هورمون كينتين بهترين هورمون در القاي بيان هر دو ژن 1 AP و UGT در نظر گرفته شد كلمات كليدي زعفران گلدهي هورمون 1 Real time PCR MYB UGT AP
چكيده انگليسي :
74 Effects of Kinetin and Gibberellin Treatments onExpression of Flowering Genes in Saffron Crocus Sativus L Farzaneh Dehghanizadeh Baghdad abad f dehghanizadeh@ag iut ac ir January 9 2018 Department of Biotechnology Isfahan University of Technology Isfahan 84156 83111 IranLanguage Farsi Degree M SC Supervisor B E SayedTabatabaei sayedt@cc iut ac ir M Talebi mtalebi@cc iut ac irAbstract Saffron Crocus sativus from Iridaceae family is known as the most expensive spice in theworld Saffron has six key stages in its life cycle Among those the flowering stage of saffron isimportance Many genes control the flowering process in this plant which the AP1 gene isreferred as flowering process markers Various compounds are produced in the saffron stigma which carotenoids are the most important and significant combination of saffron straw amongthem and they are responsible for the color of this spice The final stage of the production ofcarotenoids which includes the glycosylated of the compounds resulting from the loss ofZeaxanthin is carried out by the Glycosyl transferase 2 enzyme coded by the UGTCs2 gene There is family MYB transcription factors of upstream of both AP1 and UGT genes The studiesshow that the expression of this gene is affected by plant hormones Therefore the aim of thisstudy is investigating the effect of different hormones on the expression of MYB gene as well asAP1 and UGT genes For this purpose saffron corms were treated with Gibberellic acid 100and 200 ppm Salicylic acid 50 and 100 ppm Kinetin 10 and 20 ppm Gibberellic acid 200ppm Kinetin 20 ppm Salicylic acid ppm 50 Kinetin 20 ppm Gibberellic acid 200 ppm Salicylic acid 100 ppm Kinetin 20 ppm and Auxin 100 g Corm Gibberellic acid 100 g Corm hormonal treatments After planting and before sampling hormonal treatmentswere again applied as irrigation and the leaf tissue sampled at 12 and 24 hours after treatments To do real time PCR the specific primers were designed with using oligo7 software and thechanges of genes expression were evaluated as hormonal treatments In this study there was noadequate amplification using primers design based on MYB gene despite the studying ofdifferent pair primers The real time PCR results showed that Kinetin in the concentrations of10 and 20 ppm in both sampling times Salicylic acid at 50 and 100 ppm concentrations in bothsampling times Gibberellin in the concentration of 200 ppm in 12 hours after hormonaltreatment the hormone combination of Gibberellin 200 ppm Salicylic acid 100 ppm Kinetin20 ppm in both sampling time and Salicylic acid 50 ppm Kinetin 10 ppm in both sampling timesignificantly increased the expression of AP1 gene but Gibberellin in the concentration of 200ppm in both sampling times and in the concentration of 100 ppm at 12 hours and the hormonalcombination of Auxin 100 g Corm 100 Gibberellin 100 g Corm 100 g in both samplingtimes and Gibberellin 20 ppm Kinetin 200 ppm in both sampling times significantly decreasedin AP1 gene expression In the case of UGT gene Kinetin hormones in the concentrations of 10and 20 ppm in both sampling times Salicylic acid in the concentration of 100 ppm in bothsampling times and in 50 ppm concentration at 24 h after hormone treatment hormonalcombinations of Gibberellin 200 ppm Salicylic acid 100 ppm Kinetin 20 ppm and alsoGibberellin 200 ppm Kinetin 20 ppm resulted in the significant increase of expression andother compounds did not significantly change the expression of this gene According to theresults Kinetin was considered as the best hormone for inducing of both AP1 and UGT genesexpression Keywords Saffron Flowering Hormone AP1 UGT MYB Real time PCR
استاد راهنما :
بدرالدين ابراهيم سيد طباطبايي، مجيد طالبي
استاد داور :
رحيم مهرابي، امير مساح
