پديد آورنده :
بهادرمنش، مهسا
عنوان :
ﺧﺎﻟﺺﺳﺎزي آﻧﺰﯾﻢ ال-آﺳﭙﺎراژﯾﻨﺎز از ﻣﺤﻠﻮل ﻏﻨﯽﺷﺪه آن ﺑﺎ اﺳﺘﻔﺎده از ﮐﺮوﻣﺎﺗﻮﮔﺮاﻓﯽ ﺑﺎ ﺗﺮاوش در ژل
مقطع تحصيلي :
كارشناسي ارشد
گرايش تحصيلي :
فرآيندهاي جداسازي
محل تحصيل :
اصفهان : دانشگاه صنعتي اصفهان
صفحه شمار :
د، 68ص.: مصور، جدول، نمودار
استاد راهنما :
كيقباد شمس
توصيفگر ها :
خالص سازي , ال-آسپاراژيناز , كروماتوگرافي , ﮐﺮوﻣﺎﺗﻮﮔﺮاﻓﯽ ژلي , رسوب دهي
استاد داور :
حميد زيلويي، محمدهادي جزيني
تاريخ ورود اطلاعات :
1398/06/04
رشته تحصيلي :
مهندسي شيمي
تاريخ ويرايش اطلاعات :
1398/06/04
چكيده فارسي :
1 چکیده در یک فرآیند معمول کروماتوگرافی اولین مرحله مرحلهی به دام اندازی است که ماده مورد نظر به سطح جاذب متصل میشود در حالی که ناخالصیها متصل نمیشوند پس از آن پروتئینهایی که به میزان ضعیفی اتصال یافتهاند قبل از تغییر شرایط به منظور شستشو پروتئین مورد نظر خارج میشوند انواع روشهای کروماتوگرافی مایع برای خالصسازی پروتئین استفاده میشوند در فرآیند کروماتوگرافی ژلی یا کروماتوگرافی غربال مولکولی جداسازی در آن براساس تفاوت در اندازه پروتئینها و اندازه حفرههای فاز ساکن است آنزیم ال آسپاراژیناز تجزی ال آسپاراژین را به ال آسپاراتیک اسید و آمونیاک را تسریع می کند ال آسپاراژیناز یکی از مهمترین آنزیمهای درمانی از نظر فناوری و زیست پزشکی است از این آنزیم برای درمان لوسمی لنفوبالسیتی حاد لوسمی لنفوبالسیتی مزمن لوسمی میلوئیدی مالنوسارکوم و بیماران هوکچین و لنفوم غیرهوکچین استفاده میشود عالوه بر این ال آسپاراژیناز با ازبین بردن آکریل آمید سرطانزا که در اثر حرارت زیاد در غذاهای نشاستهدار تولید میشود خطر ابتال به سرطان را کاهش میدهد هدف از این پژوهش بررسی پارامترهای اثرگذار در خالصسازی آنزیم ال آسپاراژیناز از محلول استخراج شده آن از جگر مرغ به دو روش رسوبدهی و کروماتوگرافی ژلی میباشد در مرحلهی رسوبدهی با دو مادهی پلیاتیلن گالیکول0004 در محدوهی 01 02 04 و 06 وزنی و نمک آمونیوم سولفات در محدوده اشباع 04 06 و 08 بیشترین میزانهای خالصسازی رسوبدهی برای 02 وزنی پلیاتیلن گالیکول 0004 و 06 آمونیوم سولفات به دست آمد جهت طراحی آزمایش مدلسازی دادهها و بهینهسازی شرایط عملیاتی ستون کروماتوگرافی از روش تاگوچی در نرمافزاز مینیتب71 استفاده شد ستون کروماتوگرافی ژلی برای دو نوع ژل 57 G سوپرفین و 001 G در محدوده ارتفاع 01 تا 03 سانتیمتر 6 pH تا 8 دبی جریان 51 تا 03 میلیلیتر بر ساعت در سه حالت بدون رسوب دهنده و در حضور رسوب دهندهی آمونیوم سولفات و پلیاتیلن گالیکول مورد بررسی قرار گرفت شرایط بهینه برای ستون 57 G سوپرفین با ارتفاع 03 سانتیمتر 8 pH دبی جریان 02 میلیلیتر بر ساعت و در حضور رسوب دهنده پلیاتیلن گالیکول به دست آمد جهت بررسی حضور آنزیم و عملکرد خالصسازی از الکتروفورز استفاده شد کلمات کلیدی خالصسازی ال آسپاراژیناز کروماتوگرافی کروماتوگرافی ژلی رسوبدهی
چكيده انگليسي :
69 Purification of L asparaginase enzyme from its enriched solution using gel chromatography Mahsa Bahadormanesh m bahadormanesh@ce iut ac ir Department of chemical engineering Isfahan University of Technology Isfahan 84156 83111 IranDegree M Sc Language FarsSuperviser K Shams Professor k shams@cc iut ac irAbstractIn the usual process of chromatography the first step is the trapping stage which attachesto the absorbent surface while the impurities do not bind Subsequently proteins that areweakly bound are removed prior to changing the conditions in order to wash the desiredprotein Different Types of liquid chromatography methods are used to purify the protein The only gel chromatographic process or molecular sieve chromatography is somewhatdifferent because the isolation is based on differences in the size of proteins and the size ofthe Stationary phase cavities not on the basis of surface absorption The enzyme L asparaginase accelerates the conversion of L asparagine to L aspartic acidand Ammonia The enzyme L asparaginase is one of the most important therapies intechnology and biomedical field The enzyme is used to treat acute lymphoblasticleukemia chronic lymphoblastic leukemia myeloid leukemia melanosarcoma andpatients with Hodgkin s lymphoma and non Hodgkin s lymphoma Additionally L Asparaginase is produced by removing acrylamide which is caused by the hightemperature in starchy foods Reduces the risk of cancer The purpose of this study was to investigate the effective parameters in the purification ofL asparaginase enzyme from its rich solution from chicken liver through sedimentationand gel chromatography In the sedimentation stage two polyethylene glycol 4000 in therange of 10 20 40 and 60 and ammonium sulfate in the range of 40 60 and80 the highest sedimentation rates for 20 weight polyethylene glycol 4000 and 60 ammonium sulfate with a purity were obtained To design the experiment modeling thedata and optimizing the operating conditions of the chromatography column Taguchimethod was used in the Minitab 17 software Gel chromatography column for two types ofG 75 superfine gel and G 100 gel in the range of 10 30 height pH 6 8 flow rate of 15 30ml hr in three conditions including without sediment in the presence of optimalprecipitator of ammonium sulfate and optimal precipitator of polyethylene glycol wereinvestigated and the optimum conditions for superfine column G 75 with a height of 30cm pH 8 flow rate of 20 ml hr and in the presence of a polyethylene glycol precipitatorwere achieved Electrophoresis was used to determine the presence of the enzyme andpurification function
استاد راهنما :
كيقباد شمس
استاد داور :
حميد زيلويي، محمدهادي جزيني
