پديد آورنده :
طالقاني اصفهاني، مهشاد
عنوان :
جداسازي و شناسايي باكتريهاي اسيدلاكتيك غالب روده ماهي قزلآلاي رنگينكمان و بررسي اثر سينبيوتيكي و مهار رشد باكتريهاي بيماريزا
مقطع تحصيلي :
كارشناسي ارشد
گرايش تحصيلي :
علوم و مهندسي صنايع غذايي (زيست فناوري مواد غذايي)
محل تحصيل :
اصفهان : دانشگاه صنعتي اصفهان
صفحه شمار :
دوازده، 87 ص.: مصور، جدول، نمودار
استاد راهنما :
صبيحه سليمانيانزاد، امير حسين جلالي
توصيفگر ها :
قزلآلا رنگينكمان , باكتريهاي اسيدلاكتيك , پروبيوتيك , پريبيوتيك , لاكتوباسيلوس ساكئي , اينولين
استاد داور :
نفيسه سلطانيزاده، امير حسين مهدوي
تاريخ ورود اطلاعات :
1401/07/25
رشته تحصيلي :
مهندسي كشاورزي
تاريخ ويرايش اطلاعات :
1401/07/27
چكيده فارسي :
مصرف آنتيبيوتيكها به شكل خودسرانه براي پيشگيري از بروز و درمان بيماريها در آبزيان به ظهور باكتريهاي مقاوم در برابر آنتيبيوتيك منجر شده است. به همين علت در بسياري از كشورها قوانين بسيار سختي در زمينه استفاده از آنتيبيوتيكها وضع شده است. يكي از راههاي حل اين مشكل استفاده از مكملهاي غذايي چون پروبيوتيك، پريبيوتيك و سينبيوتيك است كه اثرات سودمندي بر ايمني و مقاومت در برابر بيماري ميزبان دارند. از آنجايي كه بهترين پروبيوتيك براي هر جاندار از دستگاه گوارش همان جاندار جدا ميشود، در اين پژوهش ماهيان از مزارع صيد شده، پس از جداسازي، همگن سازي و رقيق سازي قسمت انتهايي روده، نمونهها بر پليتهاي حاوي محيط كشت MRS agar، M17 agar و MMRS agar كشت و گرمخانهگذاري شدند. كلنيهاي تشكيل يافته، از نظر ويژگيهاي مورفولوژي و بيوشيميايي مورد بررسي و جدايههاي گرم مثبت و كاتالاز منفي براي آزمايشهاي بعدي انتخاب شدند. جدايههاي باكتريايي اسيد لاكتيك براساس توانايي رشد در حضور اسيديته متفاوت و نمك صفراوي و تفاوت در خصوصيات بيوشيمايي غربال شده و سپس مقاومت آنها به خصوصيات پروبيوتيكي از قبيل مقاومت به اسيديته متفاوت و غلظت نمك صفراوي و شرايط شبيه سازي معده مورد بررسي و غربال قرار گرفتند. در نهايت اثر ضد ميكروبي باكتريها در حضور گلوكز و اينولين بر عليه رشد باكتريهاي بيماريزا، حساسيت آنها به آنتيبيوتيكها و بررسي تحريك رشد آنها توسط اينولين، ارزيابي شد. باكتريهاي به دست آمده، از طريق آناليز توالي ژني 16S rDNA شناسايي شدند. نتايج نشان داد كه از مجموع 58 جدايه باكتريايي اسيد لاكتيك جدا شده از روده ماهي، 36 جدايه از نظر رشد در حضور شرايط مختلف اسيديته و املاح صفراوي و همچنين خصوصيات بيوشيمايي متفاوت بودند. از بين 36 جدايه غربال شده، اكثرا مقاوم به شرايط مختلف اسيديته و 12 جدايه مقاوم به املاح صفراوي بودند. از بين اين 12 جدايه، 6 جدايه توانستند در حضور شرايط شبيه سازي شده معده مقاومت كنند. 6 جدايه باكتريايي غربال شده به تنهايي در مقايسه با رشد به همراه اينولين بر ضد باكتريهاي بيماريزا ادواردسيلا تاردا و آئروموناس هيدروفيلا اثر ضد ميكروبي بيشتري دارند، اينولين در مقايسه با گلوكز، تفاوت معناداري بر تحريك رشد و زنده ماني باكتريها داشت و نسبت به آنتيبيوتيكها، نتايج متفاوتي نشان دادند. تمامي 6 جدايه با روش مولكولي، لاكتوباسيلوس ساكئي شناسايي شدند كه براي اولين بار در ايران از روده ماهي قزلآلاي رنگينكمان جداسازي شدند. نتايج اين مطالعه، پتانسيل پروبيوتيكي لاكتوباسيلوس ساكئي و دارا بودن اثر ضدميكروبي برعليه رشد باكتريهاي بيماريزا و استفاده از اينولين به همراه لاكتوباسيلوس ساكئي به عنوان تركيب سينبيوتيكي تاييد ميكند.
چكيده انگليسي :
The arbitrary use of antibiotics to prevent and treat diseases in aquatic animals has led to the emergence of antibiotic-resistant bacteria. For this reason, in many countries, very strict rules have been established regarding the use of antibiotics. One of the ways to solve this problem is to use food supplements such as probiotics, prebiotics and synbiotics, which have beneficial effects on the host's immunity and resistance to disease. Since the best probiotic for each organism is isolated from the digestive system of the same organism, in this, after separating, homogenizing and diluting the end part of the fish caught from the farms, the samples were cultured on plates containing MRS agar, M17 agar and MMRS agar culture medium and incobation. The formed colonies were examined in terms of morphological and biochemical characteristics, and gram-positive and catalase-negative isolates were selected for further experiments. Lactic acid bacteria isolates were screened based on their ability to grow in the presence of different acidity and bile salt and differences in biochemical properties, and then their resistance to probiotic properties such as resistance to different acidity and bile salt concentration and stomach simulation conditions were examined and screened. Finally, Antimicrobial effect of bacteria in the presence of glucose and inulin against the growth of pathogenic bacteria, their sensitivity to antibiotics and their growth stimulation by inulin were evaluated. The obtained bacteria were identified through 16S rDNA gene sequence analysis. The results showed that out of a total of 58 lactic acid bacteria isolates isolated from fish intestines, 36 isolates were different in terms of growth in the presence of different conditions of acidity and bile salts, as well as biochemical characteristics. Among the 36 isolates screened, most of them were resistant to different acidity conditions and 12 isolates were resistant to bile salts. Among these 12 isolates, six isolates were able to resist in the presence of the simulated conditions of the stomach. six bacterial isolates screened alone have more antimicrobial effect against pathogenic bacteria Edwardsiella tarda and Aeromonas hydrophila compared to growth with inulin, Compared to the glucose, inulin had a significant difference on stimulation growth and survival of bacteria and compared to antibiotics, they showed different results. All six isolates were identified by molecular method, Lactobacillus sakei, which were isolated for the first time in Iran from the intestine of rainbow trout. The results of this study confirm the probiotic potential of, Lactobacillus sakei and its antimicrobial effect against the growth of pathogenic bacteria and the use of inulin with, Lactobacillus sakei as a synbiotic combination.
استاد راهنما :
صبيحه سليمانيانزاد، امير حسين جلالي
استاد داور :
نفيسه سلطانيزاده، امير حسين مهدوي