توصيفگر ها :
داربست نانوليفي , پلي هيدروكسي بوتيرات , پلي كاپرولاكتون , غشا آمنيوتيك انساني , زخم سوختگي
چكيده فارسي :
غشا آمنيوتيك انساني، غشايي چند لايه غني از اسيد هيالورونيك، انواع كلاژن، لامينين، فيبرونكتين، الاستين و پروتئوگليكانها است كه ميتواند به عنوان يك ماتريس خارج سلولي عمل كند. از آمنيوتيك عمدتا جهت پانسمان زخمهاي سوختگي و مهندسي بافت استفاده ميشود. به منظور كاهش هزينه و سهولت كاربرد غشا آمنيوتيك براي پانسمان، آن را با پليمرهاي زيست سازگار جهت شبيه سازي ماتريس خارج سلولي پوست تركيب ميكنند. در اين پژوهش ابتدا سوسپانسيوني از غشا آمنيوتيك انساني سلول زدايي شده از تركيب حلالهاي اسيدفرميك/اسيداستيك جهت استفاده در محلول پليمري پليهيدروكسي بوتيرات تهيه شد. در مرحله بعد داربستهاي الكتروريسي شده از پليمر پليهيدروكسي بوتيرات و آمنيوتيك با نسبتهاي مختلف تهيه شدند. به منظور بهبود خواص مكانيكي داربست، اختلاط پليمرهاي پليهيدروكسي بوتيرات و پليكاپرولاكتون با نسبتهاي حجمي مختلف مد نظر قرار گرفت كه داربست پليهيدروكسيبوتيرات/پليكاپرولاكتون با نسبت40:60 حجمي/حجمي به عنوان داربست بهينه انتخاب شد و داربستهاي تركيبي پليهيدروكسيبوتيرات/پليكاپرولاكتون/آمنيوتيك با غلظتهاي 5و10 درصد وزني/وزني نسبت به وزن پليمر تهيه گرديد. جهت مقايسهي بيشتر، داربستهاي پليكاپرولاكتون و پليكاپرولاكتون/آمنيوتيك 5درصد وزني/وزني به عنوان داربستهاي شاهد ريسيده شدند.
پس از الكتروريسي، مرفولوژي داربستها با استفاده از تصاوير ميكروسكوپ الكتروني روبشي نشر ميداني (FE-SEM) بررسي شد كه با افزايش غلظت پليكاپرولاكتون، نانوالياف صاف و بدون بيد حاصل شدند و با افزودن آمنيوتيك به داربستها قطر نانو الياف از 600 نانومتر به 143 نانومتر كاهش يافت. خواص مكانيكي داربستها بررسي شد و بيشترين استحكام براي داربستهاي تركيبي پليهيدروكسي بوتيرات/پليكاپرولاكتون/آمنيوتيك10% وزني/وزني با استحكام 46/2 مگاپاسكال و پليكاپرولاكتون/آمنيوتيك 5% وزني/وزني با استحكام 79/2 مگاپاسكال اندازه گيري شد. پس از بررسي آبدوستي، زاويه تماس و زمان ترشوندگي براي داربست بهينه به ترتيب 42درجه و 15 ثانيه بود. براي ارزيابي رشد و چسبندگي سلولي از كشت سلولهاي مزانشيمي بر روي داربستهاي الكتروريسي شده با استفاده از تصاوير ميكروسكوپ الكتروني روبشي نشر ميداني از روز اول و سوم كشت استفاده شد. بهترين نتايج كشت سلولي مربوط به داربست پليهيدروكسيبوتيرات/پليكاپرولاكتون/آمنيوتيك 10% وزني/وزني بود. خاصيت ضد باكتري داربستها با استفاده از روش هاله عدم رشد با باكتريهاي استافيلوكوكوس اورئوس و اشرشياكلي مورد بررسي قرار گرفت كه داربست پليهيدروكسيبوتيرات/پليكاپرولاكتون/آمنيوتيك 10% وزني/وزني داراي خاصيت ضد باكتري بود.
چكيده انگليسي :
Human amniotic membrane is a multilayered membrane rich in hyaluronic acid, types of collagen, laminin, fibronectin, elastin and proteoglycans, which can act as an extracellular matrix. Amniotic is mainly used for dressing burn wounds and tissue engineering. In order to reduce the cost and ease of application of amniotic membrane for dressing, it is combined with biocompatible polymers to simulate the extracellular matrix of the skin. In this research, a suspension of decellularized human amniotic membrane was prepared from the combination of formic acid/acetic acid solvents for use in polyhydroxybutyrate polymer solution. In the next step, electrospun scaffolds were prepared from polyhydroxybutyrate and amniotic polymer with different ratios. In order to improve the mechanical properties of the scaffold, the mixing of polyhydroxybutyrate and polycaprolactone polymers with different volume ratios was considered. Concentrations of 5% and 10% w/w based on polymer weight were prepared. For further comparison, polycaprolactone and polycaprolactone/amniotic5% w/w scaffolds were spun as control scaffolds. After electrospinning, the morphology of the scaffolds was checked using field emission scanning electron microscope (FE-SEM) images, and by increasing the concentration of polycaprolactone, smooth nanofibers without beads were obtained, and by adding amniotic to the scaffolds, the diameter of the nanofibers decreased from 600 nm to 143 nm. The mechanical properties of the scaffolds were investigated and the highest strength was measured for the composite scaffolds of polyhydroxybutyrate/polycaprolactone/amniotic 10% w/w with a strength of 2.46 MPa and polycaprolactone/amniotic 5% w/w with a strength of2.79 MPa. After checking the hydrophilicity, the contact angle and wetting time for the optimal scaffold were 42 degrees and 15 seconds, respectively. To evaluate cell growth and adhesion, mesenchymal cell culture on electrospun scaffolds was used using field emission scanning electron microscope images from the first and third day of culture. The best cell culture results were related to polyhydroxybutyrate/polycaprolactone/amniotic 10% w/w scaffold. The antibacterial property of the scaffolds was investigated using the non-growth halo method with Staphylococcus aureus and Escherichia coli bacteria, and the polyhydroxybutyrate/polycaprolactone/amniotic 10% w/w scaffold had antibacterial properties.