شماره مدرك :
18761
شماره راهنما :
2103 دكتري
پديد آورنده :
عبدالله زاده، سعيده
عنوان :

بررسي ارتباط بين پروفايل اسيدهاي چرب غشاي اسپرم و مايع مني و تاثير آن بر بروز استرس اكسيداتيو و آسيب DNA در انسان و قوچ

مقطع تحصيلي :
دكتري
گرايش تحصيلي :
فيزيولوژي دام و طيور
محل تحصيل :
اصفهان : دانشگاه صنعتي اصفهان
سال دفاع :
1402
صفحه شمار :
ده، 84ص. : مصور، جدول، نمودار
توصيفگر ها :
اسپرم , انسان , قوچ , آسيب به DNA , نسبت اسيدهاي چرب امگا-6 به امگا-3 , فراسنجه هاي خون
تاريخ ورود اطلاعات :
1402/06/26
كتابنامه :
كتابنامه
رشته تحصيلي :
علوم دامي
دانشكده :
مهندسي كشاورزي
تاريخ ويرايش اطلاعات :
1402/06/27
كد ايرانداك :
2961188
چكيده فارسي :
افزايش نسبت اسيدهاي چرب امگا-6 به امگا-3 درساختار اسپرم انسان و گونه هاي مختلف حيوانات سبب افت كيفيت مني و افزايش آسيب به DNA اسپرم مي¬شود. بنابراين، تركيب اسيدهاي چرب اسپرم ممكن است تعيين¬كننده قابليت لقاح آن باشد. در مطالعه حاضر دو آزمايش جداگانه انجام شد. در آزمايش اول به منظور بررسي ارتباط بين اسپرم و نسبت اسيدهاي چرب امگا-6 به امگا-3 از 56 مرد (با ميانگين سن 25 تا 45 سال) با سابقه ناباروري يا كم باروري كه به كلنيك ناباروري اصفهان مراجعه داشته¬اند، نمونه مني تهيه شد. مردان بر اساس وضعيت DNA اسپرم به دو دسته شدت بالا وشدت پايين از آسيب DNA اسپرم گروه¬بندي و كيفيت مايع مني و اسپرم آن¬ها (شاخص¬هاي اوليه سنجش كيفيت اسپرم، ميزان هيستون‌هاي باقي‌مانده، تكه تكه شدن DNA و تركيب اسيدهاي چرب اسپرم و پلاسماي مني مورد ارزيابي قرار گرفت. مقايسه ميانگين¬هاي بين دو گروه توسط آزمون t استيودنت انجام گرفت و به منظور بررسي روابط بين متغيير¬هاي اندازه-گيري شده، از ضريب همبستگي پيرسون استفاده شد. بر اساس نتايج، در افراد با آسيب به DNA اسپرم بالا تحرك اسپرم به طور قابل توجهي پايين تر، اما ميزان هيستون¬هاي باقي مانده و پراكسيداسيون ليپيدي بالاتر بود. اسپرم مردان كه آسيب DNA بالايي داشتند، داراي ميزان بالاتري از اسيدهاي چرب اشباع، غيراشباع با يك پيوند دوگانه و نسبت اسيد¬هاي چرب امگا-6 به امگا-3 در اسپرم و پلاسماي مني بود (05/0 > P). همبستگي پيرسون يك رابطه مثبت (05/0 > P) را بين نسبت اسيد¬هاي چرب امگا-6 به امگا-3 با درصد هيستون هاي باقيمانده اسپرم، آسيب به DNA و ميزان پراكسيداسيون ليپيد¬ها هم در اسپرم و هم در پلاسماي مني نشان داد. به طور كلي، نتيجه گرفته شدكه ناباروري¬هاي ناشي از كمبود اسيدهاي چرب امگا-3 قابل تشخيص بوده و با مكمل كردن اين اسيدهاي چرب در رژيم غذايي اين افراد مي¬توان آن¬ها را درمان كرد. در آزمايش دوم از قوچ به عنوان يك مدل پستاندار استفاده و اثرافزودن دو نسبت كم و زياد از اسيدهاي چرب امگا-6 به امگا-3 بر كيفيت مايع مني، تركيب اسيد¬هاي چرب و آسيب به DNA اسپرم مورد بررسي قرار گرفت. براي اين منظور، 20 راس قوچ نژاد شال وارد يك طرح آزمايشي فاكتوريل 2×2 با 4 گروه آزمايشي (هر گروه با 5 تكرار) قرار گرفتند: 1-گروه دريافت كننده جيره با نسبت امگا-6 به امگا-3 زياد و بدون مكمل آنتي اكسيداني گياهي ، 2-گروه دريافت كننده جيره با نسبت امگا-6 به امگا-3 زياد و به همراه مكمل آنتي اكسيداني گياهي ، 3-گروه دريافت كننده جيره با نسبت امگا-6 به امگا-3 كم و بدون مكمل آنتي اكسيداني، 4-گروه دريافت كننده جيره با نسبت امگا-6 به امگا-3 كم و به همراه مكمل آنتي اكسيداني. تغذيه قوچ¬ها با جيره¬هاي حاوي نسبت كم از اسيدهاي چرب امگا-6 به امگا-3 باعث بهبود (05/0 > P) شاخص¬هاي عملكردي اسپرم شامل حجم مايع مني، غلظت اسپرم، تحرك اسپرم و شاخص HOST (به ترتيب %40، %58 ، %41 و %15) گرديد. اثر اصلي نسبت اسيدهاي چرب امگا-6 به امگا-3 نشان داد كه مصرف جيره حاوي نسبت كم از اسيدهاي چرب امگا-6 به امگا-3 منجر به كاهش (01/0 > P) وضعيت اكسيداتيو در سيتوپلاسم و غشاي اسپرم (به ترتيب %55 و %76) شد. در اين مطالعه، تغذيه قوچ¬ها با تيمار¬هاي حاوي نسبت كم از اسيدهاي چرب امگا-6 به امگا-3 (001/0 > P) آسيب به DNA (شامل شاخص هاي آنيلين بلو، كرومومايسين A3 و آكريدين نارنجي، به ترتيب %36، %90 و %68 كاهش) را به همراه داشت. علاوه بر اين، مصرف تيمار¬هاي حاوي نسبت كم از اسيدهاي چرب امگا-6 به امگا-3 به طور قابل توجهي غلظت اسيدهاي چرب دوكزاهگزاانوئيك اسيد، آيكوزاپنتاانوئيك اسيد و امگا-3 را در اسپرم افزايش داد، در حالي كاهش نسبت اسيدهاي چرب امگا-6 به امگا-3 در اسپرم (71٪، 001/0 > P)، پلاسماي سمينال (35٪، 01/0 > P)، و پلاسماي خون (55٪، 01/0 > P) را به همراه داشت. افزودن آنتي اكسيدان گياهي به خوراك باعث افزايش معني¬دار (05/0 > P) پروتئين كل و سوپراكسيد ديسموتاز (به ترتيب %5 و %29) شد، در حالي كه ليپوپروتئين¬هاي كم چگال و مالون دي-آلدهيد را كاهش (به ترتيب %19 و %36) داد (01/0 > P). به طور كلي، نتايج ما نشان داد كه مكمل كردن نسبت كم از اسيدهاي چرب امگا-6 به امگا-3 در خوراك قوچ‌ها منجر به بهبود شاخص ¬هاي كيفيت اسپرم و كاهش آسيب به DNA خواهد شد.
چكيده انگليسي :
Increased ratio of omega-6 to omega-3 fatty acids in spermatozoa has been positively correlated with induced lipid peroxidation and elevated sperm DNA damage. Therefore, the fatty acid composition of each spermatozoa might be determinant of fertility status. This research was conducted in two different studies. In the first study, a case-control study was conducted including 56 infertile men (aged from 25 to 45 years) referring to Isfahan Fertility and Infertility Center (IFIC) to investigate the relationship between sperm and seminal plasma omega-6 to omega-3 fatty acid ratio with sperm DNA fragmentation. Men were grouped into high and low percentage of sperm DNA fragmentation, and seminal and sperm parameters were assessed between the two groups. Sperm parameters (WHO criteria), oxidative stress status (BODIPY and DCF staining), residual histones (aniline blue), DNA fragmentation (TUNEL and SCSA), and plasma fatty acid composition (HPLC) were assessed. Student’s t-test and Pearson’s correlation were used as statistical methods. The men with high sperm DNA damage had lower (P<0.05) sperm motility, higher sperm residual histone, and lipid peroxidation. Men diagnosed with high sperm DNA damage possessed higher amounts of total saturated, monounsaturated, and omega-6 to omega-3 fatty acids ratio in both sperm and seminal plasma. Pearson’s correlation revealed positive correlations (P<0.05) between omega-6 to omega-3 fatty acids ratio in both sperm and seminal plasma with the percentage of sperm residual histones, DNA damage, and sperm lipid peroxidation. Overall, our results indicated that infertility caused by deficiencies in omega-3 fatty acids could be diagnosed and treated by supplementation of these fatty acids in an individual’s diet. In the second study, rams were used as a mammalian model to investigate the effect of high and low ratios of omega-6 to omega-3 fatty acid supplementation on seminal parameters, fatty acid profile, and DNA damage. A total of 20 Shall rams were allocated to a 2 × 2 factorial arrangement design. There were two ratios of omega-6 to omega-3 fatty acids (LR: low and HR: high) with or without the addition of an antioxidant supplement. Feeding LR diets showed an improvement (P< 0.05) in sperm parameters including semen volume, sperm concentration, motility, and membrane integrity (40%, 58%, 41%, and 15%, respectively). The main effect of fatty acids ratio showed that providing rams LR diet reduced (P< 0.01) the oxidative status in both sperm cytoplasm and membrane (55% and 76%, respectively). Rams fed with LR diets had lower (P< 0.01) sperm DNA damage indexes, as shown by Aniline blue, Chromomycin A3, and Acridine orange (36%, 90%, and 68% reduction, respectively). Feeding LR diets increased the concentration of DHA, EPA and omega-3 fatty acids in sperm, while reduced the ratio of omega-6 to omega-3 fatty acids in sperm (71%, P< 0.001), seminal plasma (35%, P< 0.01), and blood plasma (55%, P< 0.001). Supplementation of herbal antioxidants increased total protein and SOD (P< 0.05; 5% and 29%, respectively) while reduced the LDL and MDA content of blood plasma (P< 0.05; 19% and 36%, respectively). Overall, our results revealed that low ratio of omega-6 to omega-3 fatty acids in ram’s diet had benefit effects on their fertility throughout the incorporation of omega-3 fatty acids into the sperm structure and seminal plasma, and therefore leading the improving sperm paraments and DNA damage.
استاد راهنما :
احمد رياسي , محمد حسين نصر اصفهاني
استاد مشاور :
مرضيه تولايي , فرنوش جعفرپور
استاد داور :
اميرحسين مهدوي , اميرحسين گلي , مهدي زندي آتشبار
لينک به اين مدرک :

بازگشت