پديد آورنده :
اجل لوييان، فاطمه
عنوان :
ساخت داربست نانو ليفي پلي ﴿لاكتيك-كو-گلايكوليك اسيد﴾- كيتوزان و بررسي زيست سازگاري، تكثير و تمايز سلول هاي بنيادي بالغ بر روي آن
محل تحصيل :
اصفهان: دانشگاه صنعتي اصفهان، دانشكده نساجي
صفحه شمار :
چهارده،105ص.: مصور،جئ.ل،نمودار﴿رنگي﴾
يادداشت :
ص.ع.به فارسي و انگليسي
استاد راهنما :
حسين توانايي، ايوب آرپنايي
استاد مشاور :
محمد معصومي
تاريخ نمايه سازي :
29/2/93
استاد داور :
عبدالكريم حسيني، امير عبدالملكي، سعيد كرباسي
كد ايرانداك :
ID630 دكتري
چكيده فارسي :
چكيده با توجه به ويژگي هاي مطلوب داربست هاي نانوليفي در كاربردهاي داربست كشت سلول و به منظور بهره گيري همزمان از خواص مكانيكي پليمرهاي مصنوعي و خواص زيستي پليمرهاي طبيعي داربست نانوليفي PLGA كيتوزان الكتروريسي گرديد به علت خواص شيميايي متفاوت اين دو پليمر و عد م وجود حالل مشترك مناسب الكتروريسي بر روي امولسيون اين دو پليمر و با استفاده از محلول پلي وينيل الكل PVA به عنوان امولسيفاير انجام گرديد پس از انجام الكتروريسي PVA به راحتي با قراردادن داربست در محلول اتانل 15 خارج گرديد نتايج نشان داد كه سهم كيتوزان در مخلوط الكتروريسي شده تا 33 قابل تنظيم است داربست تهيه شده با نسبت وزني 81 PLGA و كيتوزان 12 براي انجام آزمايش هاي بعدي و نيز كشت سلول هاي فيبروبالست موشي و سلول هاي بنيادي مزانشيمي انساني استفاده گرديد آناليزهاي انجام شده توسط ميكروسكوپ الكتروني روبشي و عبوري نشان دادند كه نانو الياف يكنواخت بوده و توزيع همگوني از دو پليمر PLGA و كيتوزان در سطح مقطع آنها ديده ميشود نتايج FTIR حضور هر دو پليمر در نانوالياف تهيه شده را تاييد نموده و خواص مكانيكي مطلوبي جهت كاربرد به عنوان داربست هاي مهندسي بافت در هر دو حالت خشك استحكام كششي 49 4 مگاپاسكال و ازديادطول پارگي 93 درصد و تر استحكام كششي 13 4 مگاپاسكال و ازديادطول پارگي 3 72 درصد اندازه گيري گرديد تست اندازه گيري زاويه تماس آب نشان داد كه افزايش كيتوزان منجر به افزايش آبدوستي داربست هيبريدي 42 درجه در مقايسه با داربست PLGA تنها 5 51 درجه ميگردد همچنين نتايج آزمون كالريمتري روبشي تفاضلي و آناليز ميكروسكوپ الكتروني عبوري نشان داد كه سيستم حاصل از الكتروريسي مخلوط PLGA و كيتوزان جداشده ي فازي در مقياس ميكرو مي باشد چرا كه تباين مشخصي كه بيانگر جدايي دو فاز از يكديگر باشد در سطح مقطع نانو الياف ديده نشد و از اين رو اين مخلوط به عنوان امتزاج ناپذيز اما سازگار معرفي گرديد مقايسه زيست تخريب پذيري دو داربست نشان داد كه داربست مخلوط PLGA و كيتوزان نرخ تخريب باالتري 52 كاهش جرم پس از 8 هفته در مقابل داربست PLGA كاهش جرم 4 درصدي دارد در ادامه پتانسيل اين داربست ج هت كاربردهاي مهندسي بافت پوست بررسي گرديد و نشان داده شد كه سلول هاي فيبروبالست موشي رشد و تكثير بيشتري بر روي داربست PLGA كيتوزان در مقايسه با داربست PLGA از خود نشان ميدهند مطالعه ي زيست سازگاري تكثير و تمايز خود به خودي سلول هاي بنيادي انساني بر روي داربست مخلوط PLGA كيتوزان و مقايسه ي آن با داربست PLGA نيز نشان داد كه هر دو داربست PLGA و PLGA كيتوزان زيست سازگار بوده و از تكثير سلولي حمايت مينمايند اما داربست PLGA كيتوزان تكثير و فعاليت متابوليكي بيشتري را در محيط كشت تكثيري حمايت ميكند تمايز خود به خودي سلول هاي بنيادي كشت داده شده بر روي هر دو داربست پس از 4 روز كشت در محيط كشت تكثيري توسط آناليز qPCR انجام گرديد نتايج حاكي از اين بود كه هر دو داربست به سه رده سلولي استخوان چربي و عصب تمايز خود به خودي نشان ميدهند و تفاوت معني داري از نظر آماري بين اين دو داربست در رابطه با بيان ژن هاي مورد استفاده مشاهده نگرديد الزم به ذكر است كه هيچ يك از اين دو داربست از تمايز به سمت غضروف حمايت ننمود و به اين ترتيب ميتوان نتيجه گيري كرد كه داربست PLGA كيتوزان الكتروريسي شده داربست مناسبي جهت مطالعات هدفمند تمايز به سمت استخوان و عصب ميباشد
چكيده انگليسي :
16ABSTRACTNovel nanofibers from blends of polylactic co glycolic acid PLGA and chitosan havebeen produced through an emulsion electrospinning process The spinning solutionemployed polyvinyl alcohol PVA as the emulsifier PVA was extracted from theelectropsun nanofibers resulting in a final scaffold consisting of a blend of PLGA andchitosan The fraction of chitosan in the final electrospun mat was adjusted from 0 to 33 Analyses by scanning and transmission electron microscopy show uniform nanofibers withhomogenous distribution of PLGA and chitosan in their cross section Infraredspectroscopy verifies that electrospun mats contain both PLGA and chitosan Moreover contact angle measurements show that the electrospun PLGA chitosan mats are morehydrophilic than electrospun mats of pure PLGA Tensile strengths of 4 94 MPa and 4 21MPa for PLGA chitosan in dry and wet conditions respectively illustrate that the polyblendmats of PLGA chitosan are strong enough for many biomedical applications DSC andTEM analyses performed on PLGA chitosan nanofibers show that a microphase separatedsystem has been electrospun Hence the term immiscible but compatible blends can beapplied to the situation The biocompatibility of the PLGA chitosan scaffold and its potential for biomedicalapplications was compared to PLGA nanofibers NIH 3T3 cell lines and humanMesenchymal Stem Cells hMSCs were cultured onto both the scaffolds and theattachment proliferation and differentiation stem cells of the cells were studied NIH 3T3Cell culture studies suggest that PLGA chitosan nanofibers promote fibroblast attachmentand proliferation compared to PLGA membranes It can be assumed that the nanofibrouscomposite scaffold of PLGA chitosan could be potentially used for skin tissuereconstruction Stem cell studies revealed that both PLGA and PLGA CH scaffoldssupported viability and proliferation of human MSC with significantly higher rates onPLGA CH nanofibers Nonetheless spontaneous differentiation of MSC on either PLGAor PLGA Chitosan demonstrated a multilineage differentiation toward bone adipose andnerve tissues With the current work higher rate of proliferation and viability of stem cellswhen cultured onto PLGA CH compared to PLGA scaffold is a proof of concept forpriority of emulsion electrospun scaffolds of PLGA CH for tissue engineering applications Moreover seeding and directing the differentiation of MSC into bone and especially toneuron on the PLGA CH scaffold presented here could be interesting
استاد راهنما :
حسين توانايي، ايوب آرپنايي
استاد مشاور :
محمد معصومي
استاد داور :
عبدالكريم حسيني، امير عبدالملكي، سعيد كرباسي
