پديد آورنده :
سياپوش، سمانه
عنوان :
اثر اتيلن و جيبرليك اسيد بر سنتز و ترشح آلفا آميلاز و ليميت دكستريناز در لايه آلرون بذر جو ﴿Hordeum Vulgare)
مقطع تحصيلي :
كارشناسي ارشد
گرايش تحصيلي :
بيوتكنولوژي
محل تحصيل :
اصفهان:دانشگاه صنعتي اصفهان، دانشكده كشاورزي
صفحه شمار :
سيزده،73ص.: مصور،جدول،نمودار﴿رنگي﴾
يادداشت :
ص.ع.به فارسي و انگليسي
استاد راهنما :
آذرشاه پيري
استاد مشاور :
آقافخرميرلوحي
تاريخ نمايه سازي :
94/1/16
استاد داور :
مسعود بهار، محمد حسين اهتمام
چكيده فارسي :
چكيده اليه آلرون اليهاي نازك در بذر غالت ميباشد كه در جوانهزني بذر نقش كليدي دارد امكان جداسازي اليه آلرون بذر جو از ساير بافتهاي بذر و همچنين كشت آن در بافر مناسب باعث شده است تا محققان آن را به عنوان سيستم مدل براي مطالعه سيگنالهاي گياهي در سطح مولكولي استفاده كنند تا به حال به كمك اين سيستم ميزان سنتز و فعاليت آنزيمها و پروتئينهاي مختلف در رشد و جوانه زني بذر مورد ارزيابي قرار گرفه اند از جملهي اين مطالعات بررسي اثرهورمون GA بر توليد و ترشح آنزيم آلفاآميالز به عنوان مهمترين آنزيم در هيدروليزآندوسپرم نشاستهاي ميباشد اما تاكنون در مورد نقش هورمون اتيلن بر روي چگونگي سنتز و ترشح آنزيمهاي آلفاآ ميالز و ليميت دكستريناز كه هر دو در اليه آلرون و در پاسخ به هورمون GA توليد ميشوند اشارهاي نشده است در اين مطالعه سعي شد تا نقش هورمون گياهي اتيلن بر روي سنتز و ترشح پروتئينهاي القا شده با هورمون جيبرليك اسيد از اليه آلرون مورد بررسي قرار گيرد بدين منظور اليه آلرون به مدت 42 ساعت با هورمون GA درغلظت 5 ميلي موالر انكوبه شد سپس بدون تعويض بافر در حضور GA هورمون اتفن به غلظت هاي مختلف 3 3 3 3 33 333 352 335 3333 3332 3335 و 33333 ppm اضافه شد پروتئين محلول از اليه آلرون استخراج و بر روي ژل SDS PAGE الكتروفورز شد همچنين بافر كشت مربوط به هر تيمار جمعآوري و پروتئينهاي آن با استفاده از رسوبدهي تغليظ شد و بر روي ژل SDS PAGE الكتروفورز شد نتايج نشان داد كه با افزايش غلظت اتفن تا 33333 ppm ميزان پروتئين كل باقي مانده در اليه آلرون كم شده و از طرف ديگر مقدار پروتئينهاي خارج شده از اليه آلرون به طور قابل توجهي افزايش يافته است براي بررسي تغيرات كمي ميزان پروتئينهاي محلول به روش برد فور تعيين غلظت شد به منظور تعيين اثر هورمون اتفن بر روي سنتز و ترشح آنزيم آلفاآميالز به كمك آنتيباديهاي مربوط به هر آنزيم از تست وسترنبالت استفاده شد اين آزمايش نشان داد ميزان آزاد سازي هر دو آنزيم با افزايش غلظت اتفن اعمال شده بيشتر ميشود با توجه به تاثير اتفن بر روي افزايش فعاليت زايالناز كه در تحقيقات قبلي به اثبات رسيده است آزادساري پروتئين ها در اثر اتفن را مي توان ناشي از اثر هورمون اتيلن بر ساختمان ديواره سلولي سلولهاي اليه آلرون دانست تاثير القايي اتفن در آزاد سازي پروتئينها در مورد آنزيم LD نيز مشاهده شد بطوريكه با وجود اينكه خروج اين آنزيم از آلرونهاي تيمار شده با GA بعد از 42 ساعت مشاهده نشد و معموال خروج اين آنزيم تا 21 ساعت تيمار با GA به تاخير مي افتد با حضور اتفن در بافر خروج آن نيز القا مي گردد كلمات كليدي اليه آلرون آلفاآميالز ليميت دكستريناز اتفن
چكيده انگليسي :
The effect of ethylene on the synthesis and release of gibberellic acid induced amylase and limit dextrinase in barley aleurone layer Samaneh siapoush Sam siapush@gmail com Date of Submission September 21 2014 Department of Agricultural Biotechonolgy Isfahan University of Technology Isfahan 84156 83111 Iran Degree M Sc Language Farsi A Shahpiri Ph D Assist Professor Supervisor a shahpiri@cc iut ac irAbstractAleurone layer is a thin layer on grain seeds which has a key role in germination of the seed The possibilityof separating aleurone layer of barley seed from other layers and also cultivating it on an appropriate buffer attracted researchers to use it as a model system to study plant signals in molecular level By far using thissystem the amount of synthesis and the effects of different protein enzymes in growth and germination of theseed have been studied Among these is a study on the effect of gibberelic acid GA hormone on productionof Alpha amylase enzyme as the most important enzyme in starch endosperm hydrolyses But there is noreference to the effects of ethylene hormone on the synthesis and secretion of alpha amylase and limitdextrinase LD both have been created in aleurone layer and in response to GA hormone Present paper triesto study the effects of ethylene hormone on synthesis and secretion of induced proteins with gibberellic acidhormone from aleurone layer To that aim aleurone layer has been incubated for 24 hours in 5m Molar GAhormone Then without changing the buffer in the presence of GA hormone ethephon in different density 0 1 1 10 100 250 500 1000 2000 5000 and 10000 ppm has been added After extracting the protein thesolution from aleurone layer has been run on SDS PAGE gel Also the cultivation buffer related to eachtreatment has been collected and densified with deposition and run on SDS PAGE gel Results show that withincrease in the density of ethephon up to 10000 ppm the total amount of the protein remained in the aleuronelayer decreases and on the other hand the amount of proteins extracted from aleurone layer has significantlyincreased To study the quantitative changes the amount of solvable proteins have been densified by BradFord method In order to determine the effect of ethephon hormone on synthesis and secretion of alphaamylase enzyme the Western Blot Test has been used with the help of related anybodies The experimentshows that with the increase in the density of ethephon the amount of secretion of both enzymes increased Regarding the effect of ethephon on the increase in the activity of xylanase which has been prove in previousworks the secretion of proteins by ethephon can be considered as the effect of ethylene hormone on thestructure of cell wall in aleurone layer The inductive effect of ethephon on protein secretion regarding the LDenzyme has also been reported in such a way that despite there is no such protein with aleurone layer treatedwith GA after 24h and the secretion has been delayed in treatment with GA up to 72h in the presence ofethephon it has also been induced in the extraction buffer Keywords Aleurone layers Alpha amylase limit dextrinase ethephone
استاد راهنما :
آذرشاه پيري
استاد مشاور :
آقافخرميرلوحي
استاد داور :
مسعود بهار، محمد حسين اهتمام
