پديد آورنده :
گلشن، مليحه
عنوان :
استخراج و غني سازي آنزيم ال- آسپاراژيناز از جگر مرغ با بكارگيري نانو و ميكرو حباب ﴿Aphrons﴾
مقطع تحصيلي :
كارشناسي ارشد
گرايش تحصيلي :
مهندسي شيمي
محل تحصيل :
اصفهان: دانشگاه صنعتي اصفهان، دانشكده مهندسي شيمي
صفحه شمار :
ده، 73ص.: مصور، جدول، نمودار
يادداشت :
ص.ع. به فارسي و انگليسي
استاد راهنما :
كيقباد شمس
توصيفگر ها :
AOT , خالص سازي پروتئين , جگر مرغ , خالص سازي , افرون
تاريخ نمايه سازي :
94/1/30
استاد داور :
مهدي كديور، علي اكبر دادخواه
تاريخ ورود اطلاعات :
1396/09/26
رشته تحصيلي :
مهندسي شيمي
چكيده فارسي :
3 چكيده امروزه يكي از مهمترين خانواده داروها آنزيمها ميباشند ازجمله منابع مهم آنززيمهزا در بيوتكنولزوژي بافزتهزاي گيزاهي و انزدامهزاي حيواني هستند آنزيم ال آسپاراژيناز آنزيمي است كه در جگر مرغ وجود دارد و به دليل اهمي زت دارويزي آن در مبزارزه بزا سزرطان يزك آنزيم ارزشمند است بهطوركلي جداسازي مواد حلشده و حلنشده از محلولهاي رقيق يك كار دشوار است براي برخي از مواد ماننزد پروتئينها و آنزيمها اين مشكل جديتر ميشود اين در حقيقيت به دليل حساس بودن اين مواد در برابر تغييرات در شرايط عملياتي ماننزد دما و سرعت برشي ميباشد متأسفانه يك روش ايده آل براي خالصسازي آنزيمها وجود ندارد معمزو خزالصسزازي آنززيمهزا شزامل عمليات چند مرحله ايست كه با از دست دادن مقدار زيادي از فعاليت آنزيمها همراه است بنابراين جستجو براي توسعه روشهزاي نزوين جهت خالصسازي آنزيمها با گزينشگري كافي و بازيابي و غنيسازي كارآمد كه قادر به حفظ فعاليت آنزيمها در كنار هزينههزاي قابزل قبول و صرف حداقل زمان باشند ادامه دارد از سوي ديگر نانو و ميكروحبابها در دهههاي اخير توجههاي بسيار زيادي را به خود جلزب نمودهاند به اين دليل كه آنها در زمينههاي مختلف علمي و فناوري مورد استفاده قرار گرفتهاند از جمله موارد استفاده آنهزا مزيتزوان بزه كاربرد آنها در تصفيه آب فرآيندهاي جداسازي كاهش اصطكاك و فرآوري مواد معدني اشاره كرد هدف از اين پزووهش اسزتخراج آنزيم ال آسپاراژيناز از جگر مرغ با استفاده از نانو و ميكرو حبابها و بررسي تأثير پارامترهاي مؤثر بر روي ميزان بازدهي اسزتخراج بزود از اين رو در اين مطالعه روش جداسازي با نانو و ميكرو حبابها براي استخراج و غنيسازي آنززيم ال آسزپاراژيناز از جگزر مزرغ مزورد بررسي قرار گرفت در اين روش جداسازي بر اساس جذب سطحي آنزيم بر روي فصل مشترك گزاز مزايع صزورت مزيگيزرد جهزت توليد نانو و ميكرو حبابها يك محلول حاوي ماده فعال سطحي AOT بهوسيله همزن اولتراسونيك و همزن با پرههاي توربيني با سرعت هاي بهترتيب 8111rpm و 2111 rpm به مدت 1 دقيقه همزده شد سپس محلول حاوي آنزيم به حبابهزا اضزافه و مخلزود شزد غلظزت محلول حاوي آنزيم غني سازي شده با استفاده از دستگاه UV اندازهگيري شد جهت بررسي ميزان غنيسزازي و عزدم تغييزر ماهيزت ال آسپاراژيناز از الكتروفورز استفاده شد از روش ديناميك پراكندگي نوري DLS جهت تعيين توزيع اندازه حبابها استفاده شد ميزانگين توزيع اندازه حبابهاي توليد شده در سرعت 8111rpm در حضور نمك KCl غلظت 6 ميلي مو ر AOT و 6 pH تقريبا برابر 32nm بود مواد فعال سطحي مختلفي مورد بررسي قرار گرفت نتايج نشان داد كه ماده فعال سطحي آنيوني AOT مطلوبترين ماده فعال سطحي بود اين ماده فعال سطحي توانست نانوحبابها را توليد كند اثرات پارامترهاي مؤثري ازجمله غلظزت مزاده فعزال سزطحي AOT حضزور نمك قدرت يوني و pH محلول مورد بررس ي قرار گرفتند از دو نمك پتاسيم كلريزد و سزديم سزولفات اسزتفاده شزد در حضزور نمزك پتاسيم كلريد نتايج بهتري حاصل شد نتايج نشان داد كه در سرعت همزدن pH 6 8111rpm و غلظت 6 ميلي مو ر AOT و هنگاميكزه ميانگين توزيع اندازه حبابها 32nm بود بزا ترين ميززان غنزي سزازي حاصزل شزد سزرانجام نتزايج حاصزل از الكتروفزورز نشزان داد كزه جداسازي بهوسيله نانوحبابها ساختار ملكولي ال آسپاراژيناز را تغيير نميدهد كلمزات كليزدي AOT آنززيم ال آسزپاراژيناز نزانو و ميكزرو حبزابهزا خزالص سزازي پزروتئين جگزر مزرغ خزالص سزازي افزرون ز ز ز زز ز ززز ز ز ز ز
چكيده انگليسي :
L Asparaginase Extraction and Enrichment from Chicken Liver using Nano and Microbubbles Aphrons Malihe Golshan m golshan@ce iut ac ir Date of Submisson 12 January 2015 Department of Chemical Engineering Isfahan University of Technology Isfahan 84156 83111 IranDegree M Sc Language FarsiSupervisors Kayghobad Shams k shams@cc iut ac irAbstractNowadays one of the most important family of drugs are enzymes The major sources of enzymes inbiotechnology are plant tissues and organs of animals L Asparaginase enzyme is an enzyme that exists inchicken liver and because of its medicinal use in cancer treatment is a valuable enzyme In general separation of dissolved and undissolved materials from diluted solutions is a difficult task For substancessuch as proteins and enzymes this problem becomes more serious That is due to the fact that these materialsare sensitive to changes in operating conditions such as temperature and shear rate Unfortunately there isnot an ideal method for the purification of enzymes The enzymes purification usually involves a multistepprocess that is associated with the loss of large amounts of enzyme activity Therefore search fordevelopment of new methods for purification of enzymes with sufficient selectivity and efficient recoveryand enrichment that can preserve enzyme activity with acceptable costs and short process times is continued On the other hand nano and micro bubbles have attracted much attention in recent decades This is becausethey have been used in various fields of science and technology They have been used applications in waterpurification separation processes friction reduction and minerals processing to name but a few Theobjective of this research was to extract L Asparaginase from chicken liver using nano and micro bubbles and examine the effects of the pertinent parameters on the efficiency of extraction Hence in this study nanoand micro bubble separation method is examined for extraction and enrichment of L asparaginase from thechicken liver In this method the separation is based on adsorption of enzyme onto the gas liquid interface To produce nano and micro bubbles a solution containing AOT surfactant was agitated by ultrasonic agitatorand with homogenizer with turbine blades at speeds of 8000 rpm and 2500 rpm for 5 minutes respectively Then the enzyme solution was added and mixed with bubbles The concentration of the enriched enzymesolution was measured by UV apparatus The enrichment and the evaluation of the lack of denaturation ofL asparaginase was performed by electrophoresis Dynamic light scattering DLS was used to determine the
استاد راهنما :
كيقباد شمس
استاد داور :
مهدي كديور، علي اكبر دادخواه
