پديد آورنده :
شكوهي، مهرنوش
عنوان :
شناسايي و جداسازي راه انداز القائي rd29A از گياه آرابيدوپسيس (Arabidopsis thaliana) ارزيابي عملكرد آن در گياه تراريخت اطلسي
مقطع تحصيلي :
كارشناسي ارشد
گرايش تحصيلي :
بيوتكنولوژي كشاورزي
محل تحصيل :
اصفهان: دانشگاه صنعتي اصفهان، دانشكده كشاورزي
صفحه شمار :
پانزده، 99ص.: مصور، جدول، نمودار
يادداشت :
ص.ع. به فارسي و انگليسي
استاد راهنما :
سيروس قبادي، بدرالدين ابراهيم سيد طباطبائي
توصيفگر ها :
راه انداز nos , عناصر تنظيم كننده , PlantCARE , ژن gus , ژن DREBIB , ژن nptII
تاريخ نمايه سازي :
10/3/94
استاد داور :
بهرام شريف نبي، امير مساح
تاريخ ورود اطلاعات :
1396/10/02
چكيده فارسي :
ذ پانزده چكيده همكتتاري مشتتترك محتتركهتتاي محيطتتي و عناصتتر تنظتتيم كننتتده cis acting elements موجتتود در راهانتتداز ژنهتتتتا نقتتتتش بستتتتزايي در بيتتتتان ژنهتتتتا در شتتتترايط متييتتتتر محيطتتتتي دارد راهانتتتتداز rd29A يتتتتك راهانتتتتداز القاشتتونده Inducible promoter بتتا تتتنش استتت كتته استتتفاده از آن بتته جتتاي راهانتتدازهتتاي دائمتتي Constitutive promoter اثتترات منفتتي بتتر روي رشتتد و نمتتو گيتتاه را بتته حتتداقل متتيرستتاند در ايتتن پ ت وهش بتته منظتتور شناستتايي و جداستتازي راهانتتداز rd29A از گيتتاه آرابيدوپستتيس DNA كتتل از ايتتن گيتتاه استتتخراج شتتد آغتتازگرهتتاي اختصاصتتي بتتر استتاس تتتوالي باالدستتت ژن rd29A توستتط oligo analyser طراحتتي و دو ناحيتته از راهانتتداز rd29A بتتا طتتولهتتاي 338 و 1623 جفتتتبتتاز از آرابيدوپستتيس جتتدا و در ناقتتل pTZ57R همستتانهستتازي گرديتتد عناصتتر تنظتتيم كننتتده موجتتود بتتر روي اينتتدو تتتوالي توستتط پايگتتاه دادهي PlantCARE شناستتايي شتتد بررستتي تتتواليهتتاي متتورد مطالعتته نشتتتان داد كتتته 113 مشتتتابهت بتتتا راهانتتتداز rd29A گتتتزارش شتتتده در پايگتتتاه داده NCBI وجتتتود دارد بتتته منظتتتور بررستتي فعاليتتت راهانتتداز rd29A در گيتتاه اطلستتي شتتش دستتتواره شتتامل ژن DREB1B gus و nptII تحتتت راهانتتداز القتتائي rd29A بتتا دو تتتوالي بتته طتتول 338 و 1623 جفتتتبتتاز در ناقتتل دوگانتته 121 pBI تهيتته شتتد دستتتوارههتتاي pBI121 rd29A 1260 nptII و pBI121 rd29A 899 nptII و همچنتتتتتين pBI121 nos nptII بتتتتته عنتتتتتوان شتتتتتاهد توستتط بتتاكتري Agrobacterium tumefaciens ستتويه 1013 GV بتته اطلستتي منتقتتل شتتد گياهتتان تراريختتت رشتتد يافتتته در محتتيط حتتاوي كانامايستتن 100mg ml تحتتت تتتنش شتتوري 211 NaCl ميلتتيمتتوالر قتترار گرفتنتتد و گياهتتان متحمتتل انتختتان شتتدند حضتتور و فعاليتتت راهانتتداز rd29A در گياهتتان تراريختتت توستتط روشهتتاي مولكتتولي PCR و RT PCR تاييتتد گرديتتد القتتاي راهانتتداز rd29A در گياهتتان تراريختتت منجتتر بتته افتتزايش تحمتتل بتته كانامايستتين تحتتت شتترايط تتتنش شتتوري در مقايستته بتتا گيتتاه غيتتر تراريختتت شتتد نتتتايج حاصتتل از بررستتيهتتاي مولكتتولي و فيزيولتتوژي راهانتتداز rd29A نشتتان داد كتته راهانتتداز rd29A بتترخالف راهانتتداز دائمتتي nos تنهتتا در شتترايط تتتنش در گياهتتتان تراريختتتت اطلستتتي القتتتا متتتيگتتتردد همچنتتتين نتتتتايج فيزيولتتتوژي حاصتتتل از انتقتتتال دستتتتوارههتتتاي pBI121 rd29A nptII نتتتايج زيستتترايانتتهاي مبنتتي بتتر بيتتان بيشتتتر ژن nptII تحتتت تتتنش شتتوري در گيتتاه تراريختتت
چكيده انگليسي :
Identification and Isolation of the Inducible rd29A Promoter from Arabidopsis thaliana and Evaluation of Its Function in Transgenic Petunia Plant Mehrnoosh Shokouhi mehrnooshshokouhi@gmail com m shokouhi@ag iut ac ir January 3 2015 Department of Agricaltural Biotechnology Isfahan University of Technology Isfahan 84156 83111 IranDegree M Sc Language FarsiC Ghobadi Assist Prof Cyrus@cc iut ac irB E Sayed Tabatabaei Prof sayedt@cc iut ac irAbstractCooperation of both environmental elicitors and regulatory cis acting elements in gene promoter playssignificant role in expression of genes under variable environmental conditions Rd29A promoter is a stress inducible promoter which minimizes negative effects on plant growth and development while appliedinstead of constitutive promoters In this study in order to isolation and characterization of rd29A promoterof Arabidopsis total DNA was isolated from this plant Specific primers based on the upstream sequenceof rd29A gene were designed by oligo analyser and two regions of rd29A promoter with 899 bp and 1260bp lengths were isolated followed by cloning into pTZ57R vector Regulatory elements existing on thesetwo promoters were identified in PlantCARE database Alignment of studied sequences showed 100 similarity with previously reported rd29A promoter in NCBI database In order to evaluate the activity ofrd29A promoter in petunia plant six constructs including gus DREB1B and nptII genes were preparedunder inducible rd29A promoters of two distinct 899 bp and 1260 bp lengths in pBI121 binary vector andpBI121 rd29A 1260 nptII pBI121 rd29A 899 nptII and also pBI121 as control were transformed topetunia via strain GV3101 Agrobacterium tumefaciens bacteria Transgenic plants grown in culturescontaining kanamycin 100 mg ml were exposed to salt stress 200 mM NaCl and resistant plants wereselected Presence and activity of rd29A promoter in transgenic plants were verified by molecular tests PCR and RT PCR Induction of rd29A promoter in transgenic plants resulted in higher resistance tokanamycin under salinity in comparison to non transgenic plants Results of molecular and physiologicalsurveys of rd29A promoter demonstrated that this promoter unlike constitutive nos promoter is inducedjust under stressful conditions Moreover physiological results from transformation of pBI121 rd29A nptIIconstructs verified the consequences of bioinformatics analysis which depicted higher expression of nptIIgene under salt stress in transgenic plants bearing pBI121 rd29A 1260bp nptII construct Considering thefact that permanently expression of stress resistance genes under constitutive promoters usually obstaclesnormal growth of transgenic plants therefore inducible rd29A promoter can be a proper substitution forgenerating stress resistant plants Keywords inducible rd29A promoter nos promoter regulatory elements PlantCARE gus DREB1B nptII
استاد راهنما :
سيروس قبادي، بدرالدين ابراهيم سيد طباطبائي
استاد داور :
بهرام شريف نبي، امير مساح
