پديد آورنده :
نوروزياني ايرانشاهي، وحيد
عنوان :
بررسي اثر اوره و فاكتور رشد اپيدرمال بر كيفيت اسپرم و جنين هاي حاصل از آن و بازچرخ اسيدهاي آمينه در تخمك گاو در شرايط آزمايشگاهي
مقطع تحصيلي :
كارشناسي ارشد
محل تحصيل :
اصفهان: دانشگاه صنعتي اصفهان، دانشكده كشاورزي
صفحه شمار :
هشت، 53ص.: مصور، جدول، نمودار
يادداشت :
ص. ع. به فارسي و انگليسي
استاد مشاور :
احمد رياسي، مجيد طالبي
توصيفگر ها :
فاكتور رشد اپيدرمال , اوره , اسپرم , تخمك گاو , لقاح برون تني , بازچرخ
استاد داور :
فرزاد هاشم زاده، آذر شاهپيري
تاريخ ورود اطلاعات :
1396/05/09
چكيده فارسي :
چكيده از مهمترين عوامل مؤثر بر اقتصادي بودن فعاليت واحدهاي پرورش گاوشيري ميتوان به نرخآبستني اشاره كرد بنابراين باال بردن نرخ توليدمثلي يكي از عوامل بسيار مهم در جهت افزايش بهرهوري گله است كيفيت باالي خوراك مصرفي بهويژه پروتئين خوراك يكي از مهمترين عوامل تاثير گذار بر باروري حيوانات مزرعهاي ميباشد تحقيقات چند سال گذشته نشان دادهاند كه هر زمان غلظت نيتروژن اورهاي خون به بيش از 02 ميليگرم در دسيليتر برسد باروري كاهش مييابد پژوهشهاي اخير نشان دهنده نقش فاكتورهاي رشد در تكوين اوليه رويان و النه گزيني آن ميباشد هدف از اين پژوهش بررسي اثر اوره و فاكتور رشد اپيدرمال بر كيفيت اسپرم و جنينهاي حاصل از آن و همچنين باز چرخ اسيدهاي آمينه در تخمك گاو بود در آزمايش يك و در مرحله اول براي تعيين غلظت اوره تست تانل بر روي اسپرم انجام گرفت اين پژوهش با هدف ارزيابي توان زيستي اسپرمهاي گاو در سه تيمار گروه كنترل گروه اوره 02 02 ميليگرم در دسي ليتر و گروه اوره 04 04 ميليگرم در دسيليتر در شرايط آزمايشگاهي انجام گرفت ابتدا پارامترهاي اسپرمي شامل شمارش و قابليت تحرك بر روي نمونه ها انجام شد تا اطالعات اوليهاي در مورد كيفيت اسپرم كسب گردد نتايج نشان داد كه هرچند اختالف چنداني بين گروه كنترل و گروه اوره 02 نبود اما با افزايش سطح اوره به 04 ميزان شكستگي DNA به طور معني داري افزايش يافت با توجه به اين نتايج براي انجام مرحله بعدي تحقيق گروه اوره 04 كه در گاوهاي پرتوليد متداولتر است انتخاب شد در مراحل بعدي آزمايش كه گروههاي آن شامل گروه كنترل بدون اوره گروه اوره 04 04 ميليگرم در دسيليتر اوره گروه فاكتور رشد اپيدرمال 01 نانوگرم و اوره 04 به همراه فاكتور رشد اپيدرمال بود اسپرمها به مدت 03 دقيققه در معرض اين تيمارها قرار گرفتند پس از انجام لقاح با استفاده از تيمارهاي لقاح شده درصد كل اووسيت هاي از بين رفته لقاح نيافته تعداد زايگوتهاي رسيده به مرحله 8 2 سلولي درصد زايگوتهاي رسيده به مرحله 61 8 سلولي نرخ بالستوسيست و خروج از زونا هچينگ نسبت به كل اووسيتها بررسي شد اوره و فاكتور رشد اپيدرمال با غلظتهاي ذكر شده به محيط بلوغ تخمكها اضافه شد و نتايج در روز سه و پنج ثبت شد درصد تخمكهاي از بين رفته در هيچ كدام از گروهها تفاوت معني داري با هم نداشت درصد تخمكهاي لقاح نيافته در گروه كنترل در مقايسه با گروه هاي ديگر به طور معنيداري كمتر بود درصد تعداد جنينهاي 2 تا 8 سلولي به دست آمده نسبت به كل اووسيتها در روز هشتم تحت تاثير غلظت 04 ميلي گرم در دسي ليتر اوره و همچنين 01 نانوگرم فاكتور رشد اپيدرمال قرار نگرفت نرخ خروج از زونا تحت تاثير غلظت اوره و فاكتور رشد اپيدرمي قرار نگرفت ولي وقتي اوره و فاكتور رشد اپيدرمال با هم به محيط كشت اضافه شدند نرخ خروج از زونا با اختالف معني داري كاهش يافت در ادامه همين آزمايش در بالستوسيستهاي بهدست آمده در روز نهم پس از لقاح بيان ژنهاي BAX 2 BCL و 1 DNMT به عنوان نشانگرهايي براي شناسايي آپوپتوز مورد بررسي قرار گرفت نتايج حاصل از اين مرحله از آزمايش نشان داد كه فاكتور رشد اپيدرمال و اوره به طور همزمان ميزان بيان رونوشت ژن BAX را كاهش مي دهند اما ميزان رونوشت ژن 2 BCL در حضور همزمان اوره و فاكتور رشد اپيدرمال افزايش يافت همچنين ميزان بيان ژن 1 DNMT در حضور همزمان اوره و فاكتور رشد اپيدرمال نسبت به ساير گروهها به طور معني داري افزايش مييابد در آزمايش دوم از اين طرح ترنآور اسيدآمينهاي در محيط بلوغ تخمك گاو در معرض غلظتهاي مختلف اوره قرار گرفته در شرايط آزمايشگاهي بررسي شد در اين تحقيق نمونه ها در 3 تيمار كنترل بدون افزودن اوره و گروه 02 افزودن 02 ميلي گرم بر دسي ليتر و اوره 04 افزودن 04 ميليگرم بر دسيليتر به مدت 42 ساعت و در 6 تكرار بررسي شدند تجزيه و تحليل ترنآور اسيدآمينه اي با استفاده از دستگاه HPLC انجام شد نتايج به دست آمده از اين تحقيق نشان داد كه با افزايش ميزان اوره در محيط بلوغ تخمك ميزان باز چرخ ترنآور و مصرف كلي اسيدهاي آمينه همچون اسيدهاي آمينه ضروري در توليد شير متيونين ليزين و هيستيدين و اسيدهاي آمينه كليدي براي رشد و توسعه تخمك گلوتامين آالنين آرژنين لوسين و تريپتوفان باال ميرود كلمات كليدي فاكتور رشد اپيدرمال اوره اسپرم تخمك گاو لقاح برونتني بازچرخ
چكيده انگليسي :
54 Investigation of Interaction between Urea and Epidermal Growth Factor on the Quality of Sperm and Embryos and Turnover Amino Acids in Bovine Oocyte Vahid Noroziane Iranshahi Vn iranshahi@gmail com June 20 2017 College of Agriculture Isfahan University of Technology Isfahan 84156 83111 Iran Degree M Sc Language FarsiSupervisor R Kowsar rasoul kowsarzar@yahoo com Abstract One of the crucial effective factors on economic diary farming in the dairy cattle units is thepregnancy rate then increasing the reproduction rate is very important to raise the productivity of cattle The high quality feed especially protein is an effective factor on pregnancy of farm animals Recently theresearches indicate if nitrogen concentration of urea increases to 20 mg dl the pregnancy rate willdecrease Many researches refer to the role of growing factors in initial step of the embryo andimplantation This study aimed to examine the urea effect and growing epidermal factor on the semen sperm the embryos and recycle of amine acides in the bovine ovum In the test 1 and first step tunneltest was used to determine the urea concentration of semen sperm The purpose of this study isassessment of sperms biotic potencial in the cows The researcher used 3 groups in vitro control group 20 urea group 20 mg dl and 40 urea group 40 mg dl First to provide the basic information aboutsperm quality the sperm parameters include counting and motality were obtained from the samples Theresults show that although there is not difference between control and urea 20 group increasing urea levelto 40 raise up the DNA fragmentation index significantly Accordig to the results urea 40 group wasselected because is popular in the productive cows In the next steps with control group without urea urea 40 group 40 mg dl growing factors of epidermal group 10ng and urea 40 with growing factors ofepidermal sperms treat by these methods 30 minutes After insemination using treats total degenerated infertile oocytes and the percent of zygots 2 8 cells zygots 8 16 cells blastoscystis rate and exiting fromZona Hatching step to total oocytes were considered Urea and epidermal growing factor with thementioned concentrations added to ovum medium and results were obtained afetr 3 and 5 days Thepercentage of waste ovums has not significant difference between the groups The infertile ovums percentage was significantly decreased to other groups 40 mg dl urea and 10 ng epidermal growingfactor do not impact on the percentage of 2 8 cells embryos to oocytes in eighth day Epidermal growingfactor and urea concentration do not effect on the rate of Zona step but when urea and epidermal growingfactor added to medium simultaneous the rate of Zona step increased significantly In addition 9 th dayblastoscystis after expression of BAX BCL2 and DNMT1 as apoptosis index was studied The resultsshow that urea and epidermal growing factor simultaneously decrease the trascription of BAX gen However the trascription of BCL2 gen with existence the urea and epidermal growing factorsimultaneously will increase Expression of DNMT1 gen with existence the urea and epidermal growingfactor will increase significantly to other groups In the second test in vitro turnover of the amine acid inthe bovine ovum medium with different concentrations was considered In this study samples with threetreatments control without adding the urea group 20 adding 20 mg dl and urea 40 adding 40 mg dl during 24 hours and 6 repeats were studied The analysis of turnover of amine acid conducted by HPLCdevice The findings show that increasing the urea in the uvum medium raising up the rate of turnover usage of amine acids such as essencial amino acid to product the milk methionine lysine histidine andkey amine acid to grow the uvum glutamine alanine argening leucine and tryptophan Keywords EGF Urea Esperm Bovine Oocyte IVF Turnover
استاد مشاور :
احمد رياسي، مجيد طالبي
استاد داور :
فرزاد هاشم زاده، آذر شاهپيري
