عنوان :
اثر شوري بر الگو‌ي بيان ژن و فعاليت برخي آنتياكسيدانهاي آنزيمي در
Azoll filiculoides
مقطع تحصيلي :
كارشناسي ارشد
گرايش تحصيلي :
بيوتكنولوژي كشاورزي
محل تحصيل :
اصفهان : دانشگاه صنعتي اصفهان
صفحه شمار :
دوازده، 63 ص. : مصور، جدول، نمودار
استاد راهنما :
مجيد طالبي، بدرالدين ابراهيم سيدطباطبايي
توصيفگر ها :
آزولا , شوري , بيان ژن , آنزيم هاي آنتي اكسيدان
استاد داور :
ابوذر سورني، آقافخر ميرلوحي
تاريخ ورود اطلاعات :
1399/11/18
رشته تحصيلي :
مهندسي كشاورزي
تاريخ ويرايش اطلاعات :
1399/11/19
چكيده فارسي :
چكيده شوري به عنوان يكي از مهمترين تنشهاي محيطي گياهان محسوب ميشود كه در تمام مراحل تاثير گذار بوده و از عوامل محدود كننده توليد محصوالت كشاورزي به شمار ميرود اين تنش فرايندهاي فيزيولوژيكي مختلفي را در گياه تحت تاثير قرار ميدهد كه از مهمترين آنها آسيبهاي اكسيداتيو به اجزاي سلولي است كه توسط گونههاي فعال اكسيژن ايجاد ميشوند در مقابل گياهان نيز با توليد آنتياكسيدانهاي آنزيمي نظيركاتاالز CAT آسكوربات پراكسيداز APX و سوپراكسيد ديسموتاز SOD آثار مخرب چنين آسيبهايي را به حداقل ميرسانند با توجه به اينكه اطالعات كافي در مورد كاركرد ژنها و فعاليت آنزيمهاي آنتي اكسيداني در گياه آزوال محدود ميباشد هدف اين پژوهش بررسي تاثير تنش شوري بر ميزان فعاليت و بيان ژن آنزيمهاي آنتياكسيداني APX CAT و SOD گياه Azoll filiculoides در چهار سطح شوري ۰ ۰۶ ۰۹ و ۰۲۱ ميلي موالر NaCl و در زمان هاي ۲ ۴ و ۶ روز بررسي گرديد بدين منظور ابتدا محتواي RNA تمام نمونه ها به روش فنل كلروفرم استخراج و cDNA آنها سنتز شد پس از طراحي جفت آغازگرهاي اختصاصي دماي اتصال مناسب هر يك از آنها در واكنش شيب دمايي PCR تعيين شد و بررسي بيان ژنهاي آنزيمهاي مربوطه در واكنش Real Time PCR صورت گرفت ميزان فعاليت آنزيمهاي مربوطه نيز با استخراج عصارهي گياهي نمونه ها و انجام اسپكتوفتومتري حاصل گرديد نتايج به دست آمده نشان داد كه بيان ژن و فعاليت آنزيم كاتاالز در سطوح شوري پايين افزايش مييابد بيشترين سطح فعاليت و بيان ژن آنزيم كاتاالز در سطح شوري ۰۶ ميلي موالر NaCl ثبت گرديد كه نسبت به نمونهي كنترل افزايش معنيدار داشت و تا روز ششم اين افزايش ادامه داشت در سطح شوري ۰۹ ميليموالر افزايش بيان ژن و فعاليت آنزيم كاتاالز فقط تا روز چهارم معنيدار بود فعاليت و بيان ژن آنزيم آسكورباتپراكسيداز در سطح شوري ۰۶ ميليموالر و پس از گذشت شش روز افزايش معنيداري داشت اما در سطح شوري ۰۹ ميليموالر اين افزايش فقط تا روز چهارم ثبت گرديد بيشترين ميزان فعاليت و بيان ژن آسكورباتپراكسيداز در سطح شوري ۰۶ ميلي موالر و پس از گذشت شش روز ميباشد نتايج حاصل براي آنزيم سوپراكسيد ديسموتاز همانند دو آنزيم ديگر به اين صورت بود كه بيشترين ميزان فعاليت و بيان ژن آنزيم سوپر اكسيدديسموتاز در سطح شوري ۰۶ ميليموالر و پس از گذشت شش روز از اعمال تيمار شوري بود در سطح شوري ۰۹ ميلي موالر افزايش بيان ژن و فعاليت آنزيم فقط تا روز چهارم معنيدار بوده در سطح شوري ۰۲۱ ميليموالر ميزان فعاليت و بيان ژن هر سه آنزيم هيچگونه افزايشي نداشت با توجه به نتايج اين پژوهش به نظر ميرسد فعال شدن سسيستم دفاعي آنتياكسيدان آنزيمي نقش عمدهاي در پاسخ به افزايش سطح شوري محيط كشت آزوال مي باشد و گياه با افزايش بيان ژن و فعاليت اين آنزيمها به مقابله با تنش اكسيداتيو ميپردازد كلمات كليدي آزوال شوري آنزيمهاي آنتياكسيدان بيان ژن
چكيده انگليسي :
Effect of salinity on gene expression pattern and activation of some enzymatic antioxidants in Azolla filiculoides Hajar mojaddam Hmojaddam@gmail com September 6 2020 Department of Agricultural Biotechnology Isfahan University of Technology Isfahan 84156 83111 IranDegree M ScLanguage FarsiSupervisors Majid Talebi mtalebi@cc iut ac ir B E Sayed Tabatabaei sayedt@cc iut ac irAbstractSalinity is considered one of the most important environmental plant s stress that iseffective in all growth stages and as a limitation of agriculture crop production This stressaffects different physiological procedures that Oxidative damages to cellular componentswhich are created by reactive oxygen species are considered one the most important ofthem In response plants produce enzymatic antioxidants such as CAT APX and SOD toreduce the magnitude of these damages to the minimum Azolla is a floating aquatic fernthat grows in wetlands and has many usages such as bio fertilizers in farms and animals food Considering that Azolla also grows in sewers it seems that it can withstand salinity due to limited researches around the functions of genes and antioxidants enzymes of thisplant this research aims to analyze the effectiveness of salinity on the function andexpression amount of CAT APX and SOD antioxidant enzymes gene of AzollaFiliciloides plant in four different salinity levels 0 60 90 and 120 Milimolar NaCl and 2 4 and 6 days of treatment Therefore first the RNA components of all specimens havebeen extracted in the phenol chloroform method and their cDNA has been synthesized After designing specific primer pairs the suitable connection temperature has beenassigned by the PCR and the expression of the gene enzyme s analysis has been conductedin a real time PCR reaction The function amount of the mentioned enzymes has beenachieved with the extraction of plants sap sample and Spectrophotometry Results showthat at low levels of salinity the function and expression amount of SOD CAT and APXenzymes have increased significantly but at 90 Milimolar this increase only lasted for fourdays At 120 Milimolar the function and expression amount of all three enzymes geneshowed no increase what so ever Bearing in mind the results of this research it seems thatthe activation of antioxidants enzymes defensive system has a major role in explaining theincrease of salinity in Azolla s planting area Key words Salinity Azolla Antioxidant enzymes
استاد راهنما :
مجيد طالبي، بدرالدين ابراهيم سيدطباطبايي
استاد داور :
ابوذر سورني، آقافخر ميرلوحي
