پديد آورنده :
كبيري، محمد
عنوان :
بهينه سازي روش باززايي و انتقال ژن در اسفناج (.Spinacia oleracea L)
مقطع تحصيلي :
كارشناسي ارشد
گرايش تحصيلي :
اصلاح نباتات
محل تحصيل :
اصفهان: دانشگاه صنعتي اصفهان، دانشكده كشاورزي
صفحه شمار :
سيزده، 79، [II]ص .: مصور، جدول، شكل، نمودار
استاد راهنما :
علي محمدمير محمدي ميبدي، علي محمد شكيب
استاد مشاور :
عبدالمجيد رضايي
توصيفگر ها :
گياهشناسي اسفناج /ژن هاي خانواده SDAM-xob/ هويت مريستم گل / بافت رويشي / ترشك / تنباكو/ اگروباكتريوم تومه فاسينس / ژنتيك توليد تومور/ ناقل دوتايي / كالوس / ژن گزارشگر SUG/ مواد تنظيم كننده رشد/ تك كلوني / استخراج پلاسميد/ آنتي بيوتيك كانامايسين / ريزمغذيها/
استاد داور :
احمد ارزاني، مسعود بهار
تاريخ ورود اطلاعات :
1396/08/14
چكيده فارسي :
اسفناج بانام علمي Spinacia Oleracea L.گياه علفي و دو پايه است . خصوصيات ويژه اين گياه از جمله تعداد كم كروموزوم ، دو پايه بودن ،وجود كروموزوم هاي جنسي و كوتاه بودن دوره رشد و نمو موجب شده است تا به عنوان يك گياه مدل در مطالعات ژنتيكي تعيين جنسيت مورد استفاده قرار گيرد. هدف اين تحقيق بهينه سازي روش باززايي و انتقال ژن در گياه اسفناج بود كه زمينه را جهت مطالعه مكانيسم مولكولي گلدهي در گياهان با تكيه به اثرات ژن RAPIو RADIفراهم مي نمايد.براي جوانه زدن بذور در شرايط in vitro، ضدعفوني بذور پوست كنده به همراه 5/1 دقيقه الكل 7درصد و 25 دقيقه هيپوكلريت سديم 5 درصدمناسب ترين روش بود. در مرحله اول واكنش جدا كشت هيپوكوتيل نسبت به دو غلظت محيط پايه MSو MSنيمه غلظت و تركيبات متفاوت هورموني شامل هورمون IAAو GA3و جدا كشت مريستم نوك ساقه در محيط پايه MSبا تركيبات متفاوت هورموني شامل IAA,BAPبصورت آزمايشات فاكتوريل در قالب طرح كاملا تصادفي مورد بررسي قرار گرفتند. نتايج نشان داد جدا كشت هيپوكوتيل كه در محيط كشت القاي كالوس پايه MSنيمه غلظت حاوي mgl IAA(15+mgl GA34/3)و محيط باززايي حاوي محيط پايه MSنيمه غلظت بعلاوه mgl IAA2و GA34/3 بالاترين ميزان كالوس زايي و باززايي از نوع اندام زايي و جنين زايي رويشي بود. در مرحله دوم با توجه با نتايج كشت بافت بهينه سازي روش انتقال ژن با آزمون نوع و غلظت آنتي بيوتيكها براي كنترل رشد اگروباكترويوم )LBA4044(و نيز غلظت مناسب كانامايسين براي جلوگيري از رشد بافتهاي گياهي انجام گرديد.نتايج نشان داد كه آنتي بيوتيك سفاتاكسيم در سطح mgl100به همراه mgl200 كربني سيلين حداقل غلظت مناسب جهت كنترل رشد اگروباكتريوم مي باشد رشد جداكشت مريستم نوك ساقه در سطح mgl150 و جدا كشت هيپوكوتيل در سطح mgl50 كانامايسين متوقف گرديد. با استفاده از ژن گزارشگر GUSمراحل انتقال ژن به بافتهاي مختلف مورد بررسي قرار گرفت .آزمون GUSسنجي بيان اين ژن را در كالوس و رويش ايجاد شده از جدا كشت هيپوكوتيل كه روي محيط حاوي كانامايسين رشد يافته بود تاييد نمود
استاد راهنما :
علي محمدمير محمدي ميبدي، علي محمد شكيب
استاد مشاور :
عبدالمجيد رضايي
استاد داور :
احمد ارزاني، مسعود بهار
