پديد آورنده :
واعظي فر، صديقه
عنوان :
طراحي و ساخت داربست نانو كامپوزيتي PLGA/ كيتوزان و ارزيابي تمايز سلول هاي بنيادي مزانشيمي بر روي آن جهت مهندسي بافت عصب
محل تحصيل :
اصفهان: دانشگاه صنعتي اصفهان، دانشكده مواد
صفحه شمار :
يازده،144ص.: مصور،جدول،نمودار
يادداشت :
ص.ع.به فارسي و انگليسي
استاد راهنما :
شهناز رضوي، محمدعلي گلعذار
استاد مشاور :
محمد مرشد، سعيد كرباسي
توصيفگر ها :
پلي لاكتيك گليكوليك اسيد , سلول هاي شوان
تاريخ نمايه سازي :
8/6/93
استاد داور :
علي صمدي كوچكسرائي، سعيد نوري خراساني، رحمت اله عمادي
كد ايرانداك :
ID652 دكتري
چكيده فارسي :
چكيده در سالهاي خير با گسترش علم بين رشته ي مهندسي بافت كه تلفيقي ز بهكارگيري روشهاي سلولي مهندسي و علم مو د در ساخت بافتهاي زنده ست روزنه ميدي بر ي درمان و ترميم ضايعات بافتي و نقص عضو پديد آمده ست با ستفاده ز ين فناوري سلولهاي ناحيه ي ز بدن يا سلولهاي بنيادي ر در محيط خارج بدن كشت د ده و سپس مجتمع سلولي رشد كرده و يا تمايزيافته ر و رد بدن فرد بيمار ميكنند در بيشتر مو قع تكثير و تمايز سلولها بر روي بسترهايي صورت ميگيرد كه تقليدي ز ماتريكس خارج سلولي سلولهاي حيو ني ست ين بسترها مهندسي بافت ز جنس پليمرها مصنوعي و طبيعي ميباشند پليلاكتيكگليكوليك سيد PLGA و كيتوز ن بهترتيب ز دسته پليمرها مصنوعي و طبيعي متد ول بر كاربردها مهندسي بافت هستند در ين پژوهش با ستفاده ز دو روش د ربست مهندسي بافت نانوبيوكامپوزيتي PLGA CS تهيه شد در روش ول نانوذر ت كيتوز ن تهيهشده به روش ژلشدن يوني در محلول پليمري PLGA بهصورت يكنو خت توزيع شده و بهروش لكتروريسي تك مرحله ي با ستفاده ز يك سرنگ ريسيده شد در روش دوم تهيه نانوذر ت كيتوز ن ز محلول كيتوز ن بهروش لكترو سپري بهينهسازي شد و با ستفاده ز دو سرنگ بهطور همزمان ين نانوبيوكامپوزيت تهيه شد در ين روش لكترو سپري نانوذر ت كيتوز ن بر روي نانو لياف PLGA در حال جمعآوري بر روي در م بهطور همزمان نانوبيوكامپوزيتي يكنو خت حاصل شد ين د ربستها با سه نسبت مختلف ۸۰ ۲۰ ۷۰ ۳۰ PLGA CS و ۰۱ ۰۹ به هر دو روش با موفقيت ساخته شد در همه نسبتهاي ذكرشده و به هر دو روش ليافي با آر يش تصادفي و همر ستا تهيه شد و مشخصههاي فيزيكي شيميايي د ربستهاي تهيهشده به روشهاي مختلف رزيابي شد روشهاي مورد ستفاده در مشخصهيابي د ربست عبارت ند ز مشاهده مورفولوژي لياف توسط ميكروسكوپ لكتروني روبشي SEM و همچنين ميكروسكوپ لكتروني عبوري TEM تعيين ميز ن جذ بافر فسفات PBS تحت عنو ن نسبت تورم تعيين ز ويه تماس آ با سطح د ربست ند زهگيري خو ص مكانيكي زيست تخريبپذيري د ربست در محيط بيولوژيكي خارج ز بدن طيفسنجي مادون قرمز FTIR سپكتروسكوپي فوتو لكتروني شعه يكس XPS و مطالعه خو ص حر رتي د ربست نتايج حاصل شده در ين بخش نشان د د در حالت بهينه كمترين ميانگين قطر لياف در روش تك سرنگي و در د ربست PLGA CS با نسبت ۰۳ ۰۷ معادل ۲۸۶ nm در لياف با آر يش همر ستا بهدست آمد درصد تورم ين د ربست بهعنو ن معيار ز آبدوستي بر بر ۰۱ ۱۱ ۷۵ ۵۰۳ درصد و ميز ن تخريب نمونه در محيط بيولوژيك خارج ز بدن در مدت يك ماه ۵۳ ۰۳ درصد حاصل شد ستحكام كششي مدول يانگ و درصد زدياد طول بهترتيب بر بر ۹۱ ۱ ۰۴ ۳۱ و ۹۲ ۰ ۰۰ ۳ مگاپاسكال و ۸ ۱ ۰ ۶۳ درصد بر ين د ربست بهدست آمد در بخش سلولي پس ز ستخر ج سلولهاي بنيادي ز بافت چربي ين سلولها جهت رزيابي تمايزشان به سلول شو ن ستفاده شد پس ز رزيابي سازگاري زيستي ين سلولها با د ربستهاي تهيهشده در د مه تمايز سلولهاي بنيادي مز نشيمي به سلولهاي شو ن بر روي د ربستها با خو ص بهينه مطالعه شد سپس ثر پار مترهاي مختلف بر رشد و تكثير و تمايز سلولهاي بنيادي مز نشيمي بررسي شد پس ز بهينهسازي نهايي خو ص د ربست و رشد و تكثير و تمايز سلولها بر روي آن تمايز سلولهاي بنيادي به سلولهاي شو ن ز نظر يمونوسايتوشيمي ثبات شد و ين محصول بهعنو ن فرآورده مهندسي بافت بهينه جهت ترميم ضايعات عصا محيطي معرفي شد روشهاي مورد ستفاده در ين بخش شامل بررسي ميز ن چسبندگي سلولها به د ربست رزيابي ميز ن بقا سلولها و تكثير سلولي ز طريق روش MTT و رزيابي ميز ن سلولهاي تمايزيافته ست جهت بررسي درصد سلولهاي تمايزيافته به سلولهاي شو ن ز روش رنگآميزي يمونوفلورسنت ماركرهاي S100 MBP GFAP ستفاده شد و نتايج نشان د د بيشترين درصد بيان ماركرها ختصاصي ذكرشده در د ربست PLGA CS تهيهشده به روش تك سرنگي با نسبت ۰۳ ۰۷ با آر يش لياف همر ستا بهترتيب بر بر ۵ ۹۸ ۷ ۵۸ و ۱ ۶۹ درصد حاصل شد هر مرحله ز آزمايشها سه بار تكر ر شد و آناليز آماري د دهها با ستفاده ز نرم فز ر 71 SPSS و تجزيه و تحليل يافتهها با ستفاده ز روش One Way ANOVA نجام شد ين نتايج نشان د د كه د ربستها PLGA CS با آر يش لياف همر ستا قابليت كاربرد وسيع جهت ترميم و بازساز عصا محيطي د رند كلمات كليد مهندسي بافت عصب د ربست نانو لياف پليلاكتيكگليكوليك سيد كيتوز ن سلولها شو ن
چكيده انگليسي :
145Department Materials EngineeringDate March 17 2014Abstract In this study nano biocomposites composed of poly lactide co glycolide PLGA andchitosan CS were electrospun using two different fabrication methods In the singlenozzle method the CS nano powders dispersed in PLGA solutions were electrospunthrough a single nozzle In the double nozzle method PLGA and CS solutions weresimultaneously electrospun from two different syringes and the electrospun PLGAnanofiber and electrosprayed CS nanoparticles were mixed and collected on the rotatingdrum to prepare the nano biocomposite membrane The PLGA CS scaffolds were preparedat the different ratios of 90 10 80 20 and 70 30 w w In both methods were producedsuccessfully randomly oriented and aligned PLGA and PLGA CS nanofibrous scaffolds However the single nozzle method was associated with decreasing average fiber diameterof PLGA CS nano biocomposites when the CS content was increased Moreover thebiocomposites fabricated by this method exhibited improved mechanical and hydrophilicproperties in the evaluation of the scaffolds produced The differentiation of humanadipose derived stem cells h ADSCs on artificial scaffolds is a critical issue inregeneration medicine The Schwann cells SCs may be obtained from nerve biopsies forautologous transplantation However it is difficult to obtain sufficient amount of SCs forclinical applications H ADSCs can be induced to differentiate into Schwann like cells S like cells and used for autologous transplantation In this study tissue engineered scaffoldwith chitosan nano powders CS and poly lactide co glycolide PLGA was investigatedfor its ability in the peripheral nerve regeneration in vitro The differentiation of h ADSCson PLGA CS scaffolds produced Schwann cells Six groups were compared for generatingSchwann cells from ADSCs by considering the expression of several Schwann cellmarkers GFAP MBP and S100 using immunocytochemistry after differentiation Schwann cell viability and morphology were investigated by the MTT assay and SEMmicrographs Moreover the nano chitosan promoted the formation of Schwann cells However the align orientation of nanofibers in scaffolds guided the differentiation ofADSCs towards Schwann cells in the constructs Therefore the combination of nano chitosan and fiber alignment in PLGA CS scaffolds can be promising in peripheral nerveregeneration Keywords Chitosan nanoparticles Electrospinning Nano Biocomposite PLGA Peripheral nerve regeneration Tissue engineered scaffold Differentiation Human ADSCs Schwann cell Prof Department of Materials Engineering Email Golozar@cc iut ac ir Prof Department of Textile Engineering Email Morshed@cc iut ac ir Assoc Prof Department of Materials Engineering Email Raeissi@cc iut ac ir1 IntroductionIn recent years autogenetic and allogenetic tissues have been used as substitutes in thetreatment of damaged tissues However secondary surgery would bring donor sitemorbidity and lead to infections or immune responses 1 2 This warrants developing anovel approach to tissue regeneration Tissue engineering is a promising approach recentlydeveloped for repairing or regenerating damaged tissues by developing biologicalsubstitutes that can restore and maintain the functions of tissues or organs 3 Cells should
استاد راهنما :
شهناز رضوي، محمدعلي گلعذار
استاد مشاور :
محمد مرشد، سعيد كرباسي
استاد داور :
علي صمدي كوچكسرائي، سعيد نوري خراساني، رحمت اله عمادي
