9549

8816

كارشناسي ارشد

كشاورزي - علوم دامي

اصفهان: دانشگاه صنعتي اصفهان، دانشكده كشاورزي

1393

[يازده]،77ص.: مصور،جدول

ص.ع.به فارسي و انگليسي

حميدرضا رحماني، محمدحسين نصراصفهاني

مهدي حاجيان

26/11/93

احمد رياسي، بدرالدين ابراهيم سيد طباطبائي

مهندسي كشاورزي

ID8816

چكيده امروزه توليد آزمايشگاهي جنين IVEP به عنوان يكي از مهم ترين جنبههاي علم مدرن مورد توجه است IVEP روشي مفيد و با ارزش براي توليد حيوانات به لحاظ اقتصادي ميباشد اووسيتهاي برداشته شده از تخمدانهاي گوسفندي كه براي IVEP استفاده مي شوند به لحاظ كيفيت و شايستگي تكويني هتروژنوس هستند به دليل كيفيت پايين اووسيت در شروع بلوغ IVEP ناكارامد است اووسيتهاي برگرفته از تخمدانها جمعيت هتروژنوسي از هر دو گروه اووسيتهاي در حال رشد BCB و اووسيتهاي كامل رشد يافته BCB هستند در اين جمعيت هتروژنوس يك تأخير در بلوغ وجود دارد كه مي تواند به دليل وجود اووسيتهاي BCB در اين جمعيت باشد به طوريكه اين دسته از اووسيتها يك عدم همزماني بين بلوغ سيتوپالسمي و بلوغ هسته اي دارند به همين دليل ظرفيت تكويني اووسيتهاي BCB از اووسيتهاي BCB پايين تر است عالوه بر اين كشت پيش از بلوغ اووسيت PMC قبل از بلوغ آزمايشگاهي براي بهبود تكوين اووسيت پيشنهاد شده است ثابت شده است كه پيامبر ثانويه آدنوزين مونو فسفات حلقوي cAMP نقش اساسي در القاي توقف ميوزي ايفا ميكند و آنزيم فسفودي استراز نوع 1 درون اووسيت و آدنيليل سيكالز درون سلولهاي كومولوس به ترتيب با تجزيه و سنتز cAMP باعث كاهش و افزايش سطح اين پيامبر ثانويه درون اووسيت ميشوند بدين ترتيب استفاده كردن از عوامل مهار كننده فسفو دي استراز نوع 1 و فعال كننده آدنيالت سيكالز ميتواند باعث افزايش سطح cAMP درون اووسيت شده و در نتيجه باعث القاي توقف ميوزي شوند بنابراين هدف اين مطالعه بررسي تأثير سيلوستامايد يك مهار كننده 3 PDE و يا فورسكولين يك فعال كننده آدنيالت سيكالز بر توقف ميوزي و نرخ تكويني اووسيتهاي BCB گوسفندي جدا سازي شده بر اساس تست BCB بود بر اين اساس يك سيستم كشت دو مرحله اي شامل 1 8 10 و 22 ساعت كشت در حضور 0 ميكروموالر سيلوستامايد و يا 15 ميكروموالر فورسكولين و به دنبال آن 22 ساعت كشت در محيط بلوغ طراحي شد نتايج نشان داد كه فورسكولين در طي 1 ساعت PMC به طور معني داري توقف ميوزي اووسيتهاي BCB را در مرحله GV افزايش داد 50 0 P و نسبت به سيلوستامايد و تركيب اين دو دارو تأثير بهتري داشت عالوه بر اين فورسكولين به طور معني داري نرخ و كيفيت بالستوسيستهاي حاصل شده از اووسيت هاي BCB گوسفندي را افزايش داد 50 0 P بنابراين نتيجه گرفته شد كه سيستم كشت دو مرحله اي ممكن است شايستگي تكويني آزمايشگاهي اووسيتهاي BCB گوسفندي را بهبود ببخشد واژگان كليدي گوسفند كشت دو مرحله اي تست BCB تكوين جنيني

10The Effect of Cilostamide and Forskolin on Two Step in vitro Maturation and Development of Parthenogenesis Embryos Derived of Ovine Oocytes Isolated by Glucose 6 Phosphate Dehydrogenase Activity Nima Azari Dolatabad N azari@ag iut ac ir 1 December 2014 Department of Animal Science Isfahan University of Technology Isfahan 84156 83111 IranDegree M Sc Language FarsiSupervisors H R Rahmani h rahmani@cc iut ac ir M H Nasr Esfahani mh nasr esfahani@royaninstitute orgAbstractIn vitro embryo production IVEP is concerned as one of the most important aspects of modern science IVEP is a beneficial and valuable method for economical production of animal Oocytes retrieved from ovineovaries that are used to IVEP are heterogeneous in terms of quality and developmental competence Becausethe poor quality of the oocyte at the onset of maturation IVEP is inefficient Oocytes retrieved of ovaries areheterogeneous population of both growing oocytes BCB and fully grown oocytes BCB In thisheterogeneous population there is a delay in the maturation of oocytes which may be because of the BCB oocytes in this population so that this type of oocytes have an asynchronization between cytoplasmic andnuclear maturation Therefore the developmental capacity of BCB oocytes is lower than BCB oocytes Inaddition the pre maturation culture PMC oocyte before oocyte maturation has been suggested to improvedevelopment of oocyte Second messenger cyclic adenosine mono phosphate cAMP has been proven cAMP plays an essential role in the induction of meiotic arrest and the phosphodiesterase type 3 enzyme inoocytes and adenylyl cyclase enzyme in cumulus cells by degrading and synthesis cAMP result in decreaseand increase respectively the level of the second messenger in the oocyte Thus the use of inhibitors ofphosphodiesterase type 3 and activator of adenylate cyclase can increase the level of cAMP in the oocyte andthus induce meiotic arrest Therefore the aim of this study was to evaluate the effect of cilostamide aninhibitor of PDE3 and or Forskolin an activator of adenylate cyclase on meiotic arrest and developmentalrate ovine BCB oocytes were isolated by BCB test Accordingly a two step culture system consisting of 6 8 10 and 22 hours of culture in the presence of 1 M cilostamide and or 50 M Forskolin followed by 22 h ofculture in maturation medium was designed The results showed that during the 6 hours PMC Forskolinsignificantly meiotic arrest BCB oocytes at GV stage increased P 0 05 and then cilostamide and thecombination of these two drugs was better effect Moreover Forskolin significantly increased the rate andquality of blastocysts derived from ovine BCB oocytes P 0 05 Therefore it was concluded that a two stepculture system may improve the developmental competence of in vitro ovine BCB oocytes Keywords Ovine two step culture PMC BCB test embryonic development

حميدرضا رحماني، محمدحسين نصراصفهاني

مهدي حاجيان

احمد رياسي، بدرالدين ابراهيم سيد طباطبائي